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基于微流控技術(shù)的表面增強拉曼在細胞檢測領(lǐng)域的應(yīng)用

表面增強拉曼光譜(Surface-enhanced Raman Spectroscopy, SERS)是指當(dāng)一些分子被吸附到某些粗糙的金屬表面上時,由于樣品表面或近表面的電磁場的增強導(dǎo)致吸附分子的拉曼散射信號比普通拉曼散射(NRS) 信號大大增強的現(xiàn)象,現(xiàn)已被證明是一種快捷高效的光譜學(xué)檢測方法。SERS具有較高的檢測靈敏度,極易適用于弱信號樣品的檢測,但在實際應(yīng)用中,SERS技術(shù)的重復(fù)性和檢測限一直難以兩全。因此,SERS技術(shù)的重復(fù)性與靈敏度一直是科學(xué)研究的重點。

研究成果:

a近日,由西安電子科技大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院的胡波課題組提出了一種基于軟管微流控的動態(tài)流體SERS平臺,有效解決了目前SERS檢測中存在的問題,并將其成功應(yīng)用于乳腺癌細胞的檢測與分類,該平臺有望成為液體環(huán)境中無標記細胞檢測的強大工具,并且在細胞學(xué)研究、臨床診斷和食品安全等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

傳統(tǒng)的測試方法與微流控技術(shù)的優(yōu)劣勢對比:

傳統(tǒng)的SERS測量方法有兩種:靜態(tài)固相及靜態(tài)液相兩種方法。靜態(tài)固相SERS檢測由于分析物與納米顆粒在基底上難以實現(xiàn)均勻混合分布,往往在同一次檢測中難以獲得強度均一的光譜信號。而靜態(tài)液相雖然可以在一定程度上解決分析物與納米顆粒在空間尺度上的均勻分散問題,但是由于液體處于靜止?fàn)顟B(tài),存在混合時間不確定、不規(guī)則散射、局部加熱和光離解等問題,因此很難保證光譜重現(xiàn)性。此外,這兩種方法還都需要預(yù)混合、干燥等預(yù)處理步驟,以及混合時間長等缺點。

微流控技術(shù)作為快速處理小體積流體的一種技術(shù),當(dāng)和SERS技術(shù)聯(lián)用組成微流控-SERS系統(tǒng)時,能夠?qū)崿F(xiàn)動態(tài)流動條件下的SERS光譜的連續(xù)采集,在提高SERS檢測重復(fù)性的同時也增加了檢測效率。

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然而傳統(tǒng)的微流控芯片加工制備需要造價高昂的潔凈室,且過程耗時耗力。其他無需潔凈室的微流控芯片加工方法仍需昂貴且專業(yè)的儀器,加工精度在一定程度上受到限制。西安電子科技大學(xué)團隊采用商用、生物相容、透明的微軟管嵌入3D打印支撐模板中組成的軟管微流控SERS平臺,能夠動態(tài)地混合溶液、精確地控制混合時間并且能夠用于SERS光譜的連續(xù)采集。

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與傳統(tǒng)靜態(tài)固相和靜態(tài)液相測量方法相比,動態(tài)流體SERS平臺通過對模型分子的表征,分別以1.90%和4.98%的相對標準偏差展現(xiàn)了良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

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此外,利用該平臺采集三種乳腺細胞的拉曼光譜:正常(MCF-)10A)乳腺細胞及輕度惡性腫瘤(MCF-7)惡性(MDA-MB-231)乳腺癌細胞3例獨立的實驗,并結(jié)合K近鄰(K-NN)算法的分類鑒定,實現(xiàn)了靈敏度在83.3%以上,特異性在91.6%以上,準確度為94.4%的無標記細胞檢測。

基于軟管微流控的動態(tài)流體SERS平臺具有加工成本低、制作方法簡單等優(yōu)勢,豐富了微流控芯片的加工制備技術(shù)。而且可在短時間內(nèi)采集大量連續(xù)流體的SERS光譜,具有快速、通用、靈敏、可靠、低成本和不需要預(yù)處理的優(yōu)點。該平臺有望成為液體環(huán)境中無標記細胞檢測的強大工具,并且在細胞學(xué)研究、臨床診斷和食品安全等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

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這一成果近期發(fā)表在Analytical Chemistry 上,該文章是西安電子科技大學(xué)胡波課題組完成,文章的第一作者是西安電子科技大學(xué)碩士研究生續(xù)小丁和博士后趙磊。

本研究采用的是北京卓立漢光儀器有限公司“Finder One”微區(qū)激光拉曼光譜系統(tǒng),如需了解該產(chǎn)品,歡迎咨詢我司。

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