前言

免疫療法改變了目前癌癥治療的模式，特別是免疫檢查點(diǎn)抑制劑，在黑色素瘤等癌癥方面取得了令人矚目的成果。包括CTLA－4， PD－1／PD－L1的免疫檢查點(diǎn)抑制性抗體被FDA批準(zhǔn)用于多種癌癥類型的治療。然而，只有20－30％的病例觀察到持久的反應(yīng)，因此，迫切需要新的免疫治療靶點(diǎn)。

BTLA（CD272）是另一種重要的共抑制受體，其配體為皰疹病毒侵入介質(zhì)（HVEM）。雖然BTLA與PD－1和CTLA－4有相似之處，但它們?cè)诒磉_(dá)和功能方面有所不同。HVEM在各種細(xì)胞類型中廣泛表達(dá)，并參與免疫穩(wěn)態(tài)。HVEM在多種腫瘤中表達(dá)上調(diào)，靶向BTLA和HVEM在腫瘤免疫治療中表現(xiàn)出非常富有前景的應(yīng)用潛力。

BTLA和HVEM

BTLA屬于CD28家族，與PD－1和CTLA－4具有結(jié)構(gòu)相似性。它具有細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域、免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）以及免疫受體基于酪氨酸的開關(guān)基序（ITSM）。BTLA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)包括ITIMs的磷酸化和含有SH2結(jié)構(gòu)域的磷酸酶1（SHP－1）／SHP－2結(jié)合，從而抑制T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

在健康人中，來(lái)自外周血的幼稚CD4＋和TCD8＋T細(xì)胞的BTLA表達(dá)較高。在CD4＋分化期間，BTLA的表達(dá)保持較高水平，而在CD8＋T細(xì)胞分化期間，BTLA的表達(dá)下調(diào)。在γδ－T細(xì)胞上也觀察到類似的結(jié)果，BTLA在靜止的Vγ9Vδ2細(xì)胞（人外周血中的主要γδ－T細(xì)胞亞群）上高度表達(dá)，并在Vγ9Vδ2分化過(guò)程中下調(diào)。體外BTLA阻斷增強(qiáng)了CD8＋T細(xì)胞增殖，此外，BTLA陽(yáng)性DC細(xì)胞參與外周Treg誘導(dǎo)，這些數(shù)據(jù)強(qiáng)調(diào)了BTLA在免疫穩(wěn)態(tài)中的重要性。

HVEM（TNFRSF14）是TNF受體家族成員，HVEM在肺、腎和肝中表達(dá)較高，在心臟、胎盤、骨骼肌和胰腺中中等表達(dá)，在大腦中表達(dá)極低。在免疫細(xì)胞中，HVEM由靜止的T細(xì)胞和B細(xì)胞、NK細(xì)胞、Treg、單核細(xì)胞和DC強(qiáng)烈表達(dá)。間充質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞也表達(dá)HVEM。在上皮細(xì)胞中，HVEM表達(dá)在先天性粘膜防御病原菌方面起著關(guān)鍵作用。

HVEM與BTLA的相互作用是最早發(fā)現(xiàn)的Ig結(jié)構(gòu)和TNFR家族之間的連接。HVEM在BTLA之外還有其他配體，如CD160、LIGHT、淋巴毒素－α（LTα）和單純皰疹病毒糖蛋白D。當(dāng)HVEM與LIGHT或LTα結(jié)合時(shí)，傳遞共刺激信號(hào)，而HVEM與BTLA或CD160結(jié)合則觸發(fā)共抑制信號(hào)。因此，HVEM通常被描述為取決于所接合配體的分子開關(guān)。然而，HVEM－／－小鼠對(duì)T細(xì)胞刺激的反應(yīng)增強(qiáng)，對(duì)自身免疫疾病的易感性增強(qiáng)， 表明HVEM的共抑制信號(hào)強(qiáng)于共刺激信號(hào)。

HVEM在腫瘤中的作用

腫瘤中HVEM上調(diào)代表了一種免疫逃逸機(jī)制，類似于腫瘤細(xì)胞過(guò)度表達(dá)PD－L1或PD－L2。HVEM在一些腫瘤中過(guò)表達(dá)，并且顯示腫瘤浸潤(rùn)T細(xì)胞呈BTLA陽(yáng)性。此外，HVEM的高表達(dá)與顯著較差的預(yù)后相關(guān)，在另一項(xiàng)對(duì)136例胃癌活檢的研究中，HVEM表達(dá)增加與疾病進(jìn)展和總體生存率降低相關(guān)。

在另一項(xiàng)關(guān)于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的研究中，通過(guò)對(duì)34個(gè)膠質(zhì)瘤組織進(jìn)行IHC評(píng)估，HVEM表達(dá)定位于周圍壞死區(qū)域和微血管增生區(qū)域。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，HVEM表達(dá)與免疫細(xì)胞浸潤(rùn)和微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞有關(guān)。HVEM的表達(dá)也與PD－1、PD－L1、CTLA－4、LAG－3和VISTA的表達(dá)相關(guān)，因此，HVEM在免疫和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用，尤其是T細(xì)胞的激活。

總之，這些數(shù)據(jù)表明HVEM上調(diào)與許多實(shí)體癌的腫瘤進(jìn)展和侵襲性密切相關(guān)。

BTLA在腫瘤中的作用

BTLA在腫瘤中的表達(dá)

研究顯示，BTLA在惡性組織中的表達(dá)高于正常組織，較高的BTLA表達(dá)與較高的HVEM表達(dá)呈正相關(guān)。此外，BTLA表達(dá)影響預(yù)后，低BTLA表達(dá)組的5年總生存率（OS）為48．3％，當(dāng)BTLA高表達(dá)時(shí)下降到17．9％。較高的BTLA表達(dá)也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。

BTLA與其他共抑制受體表達(dá)相關(guān)。在晚期黑色素瘤中，F(xiàn)ourcade等人證明42％的NY－ESO－1特異性CD8＋T淋巴細(xì)胞共同表達(dá)BTLA和PD－1，這些細(xì)胞具有部分功能失調(diào)表型。當(dāng)NY－ESO－1特異性CD8＋T淋巴細(xì)胞受到同源抗原的長(zhǎng)時(shí)間刺激時(shí)，TIM－3和PD－1上調(diào)。BTLA表達(dá)遵循不同的模式，這表明BTLA上調(diào)取決于不同的條件，而不是由高抗原負(fù)載驅(qū)動(dòng)的功能耗竭。此外，抗BTLA抗體阻斷BTLA可增強(qiáng)NY－ESO－1特異性CD8＋T細(xì)胞產(chǎn)生IFN－γ、TNFα和IL－2。有趣的是，當(dāng)抗BTLA與抗PD－1聯(lián)合時(shí)，在功能分析中觀察到協(xié)同效應(yīng)。

BTLA：T細(xì)胞耗竭的重要部分

在肺癌中，BTLA的表達(dá)和功能尚不清楚，然而，已經(jīng)報(bào)告了一些關(guān)鍵數(shù)據(jù)。在皮下肺腫瘤植入的小鼠模型中，Mittal等人顯示CD4＋和CD8＋T細(xì)胞上的BTLA增加，以及其他共同抑制標(biāo)記物，如PD－1和2B4。

Thommen等人在人類肺腫瘤樣本中證實(shí)并擴(kuò)展了該研究。研究對(duì)NSCLC活檢中的TIL進(jìn)行了詳細(xì)的免疫分型，發(fā)現(xiàn)晚期腫瘤浸潤(rùn)性CD8＋T細(xì)胞亞群中PD－1和Tim－3的表達(dá)增加。BTLA陽(yáng)性細(xì)胞的百分比相當(dāng)?shù)�，但遵循與PD－1和TIM－3相同的模式。BTLA＋CD8＋T細(xì)胞也高度表達(dá)其他共抑制受體，表明BTLA在T細(xì)胞耗竭的后期上調(diào)。研究認(rèn)為，共抑制受體的順序表達(dá)始于PD－1，然后是TIM－3、CTLA－4和LAG－3，最后是BTLA。

事實(shí)上，PD－1阻斷可部分挽救依賴于PD－1表達(dá)的T細(xì)胞功能。然而，只有具有中等PD－1表達(dá)的CD8＋T細(xì)胞才能從抗PD－1治療中獲益，而PD－1高表達(dá)CD8＋T細(xì)胞已處于深度耗竭，無(wú)法恢復(fù)功能。值得注意的是，與PD－1int亞群相比，PD－1high亞群表達(dá)的TIM－3、CTLA－4、LAG－3和BTLA數(shù)量也更高。因此，與PD－1阻斷的聯(lián)合策略是一個(gè)值得探索的方向。

值得注意的是，Lou等人研究了肺癌中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）與免疫激活之間的相關(guān)性，證實(shí)EMT與炎癥轉(zhuǎn)錄組學(xué)特征密切相關(guān)。此外，在顯示有EMT的腫瘤中，包括BTLA在內(nèi)的免疫檢查點(diǎn)的轉(zhuǎn)錄組表達(dá)增加，并與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞募集相關(guān)。這表明EMT可以通過(guò)BTLA依賴機(jī)制受炎癥微環(huán)境的調(diào)節(jié)，這個(gè)為探索BTLA在非免疫細(xì)胞上的表達(dá)開辟了一個(gè)新的研究領(lǐng)域。

目前，君實(shí)生物的抗BTLA單抗TAB004（JS004）正處于臨床階段（NCT04278859、NCT04137900和NCT04477772）。

小結(jié)

總之，BTLA－HVEM在腫瘤免疫中確實(shí)參與了免疫逃逸。事實(shí)上，腫瘤細(xì)胞對(duì)HVEM的上調(diào)通過(guò)BTLA參與抑制抗腫瘤免疫，導(dǎo)致疾病進(jìn)展和較差的預(yù)后。BTLA觸發(fā)的抑制被阻斷可以進(jìn)一步改善腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞功能，并且聯(lián)合阻斷BTLA和PD－1顯示出顯著的協(xié)同效應(yīng)。因此，靶向BTLA或HVEM是一個(gè)很有前途的新方向。

參考文獻(xiàn)：

1．BTLA－HVEM Couple in Health and Diseases：Insights for Immunotherapy in Lung Cancer． Front Oncol． 2021； 11： 682007．

       原文標(biāo)題 : 靶點(diǎn)說(shuō) | BTLA-HVEM