文章背景簡介

心力衰竭是多種心血管疾病的臨床綜合征,通過左室重構(gòu)導(dǎo)致高發(fā)病率和死亡率,其中以心肌纖維化為主要病理改變。細胞外基質(zhì)在心肌間質(zhì)中的過度沉積是心肌細胞丟失引起的修復(fù)過程的一部分,稱為替代性纖維化。而反應(yīng)性纖維化則是發(fā)生在心肌細胞沒有明顯損失的情況下。替代性纖維化主要發(fā)生在心肌梗死(MI)后的早期修復(fù)階段,反應(yīng)性纖維化則通常出現(xiàn)在壓力超負荷誘導(dǎo)的心肌肥厚中。這兩種纖維化反應(yīng)都會增加心肌硬度,隨后重塑心室結(jié)構(gòu),導(dǎo)致收縮和舒張功能障礙,最終導(dǎo)致心力衰竭。 心肌成纖維細胞分化為一種獨特的細胞類型并會導(dǎo)致心肌纖維化。肌成纖維細胞也有可能與損傷心臟內(nèi)的其他多種細胞類型發(fā)生轉(zhuǎn)分化,導(dǎo)致細胞外基質(zhì)生成加重,從而導(dǎo)致心臟重塑。由于其在心臟纖維化過程中的關(guān)鍵作用,心肌肌成纖維細胞活化是一個重要的治療靶點,備受關(guān)注。

EphrinB2(促紅細胞生成素生成肝癌相互作用體B2)是促紅細胞生成素生成肝癌B受體的細胞表面跨膜配體,是一種關(guān)鍵的雙向信號分子,在哺乳動物中廣泛表達。在與鄰近細胞上產(chǎn)生促紅細胞生成素的肝癌B受體結(jié)合時,EphrinB2不僅通過激活產(chǎn)生促紅細胞生成素的受體酪氨酸激酶(tyrosine kinase)發(fā)出正向信號,而且還觸發(fā)稱為反向信號的內(nèi)在信號。新的研究表明,在發(fā)育和疾病進展過程中,EphrinB2反向信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在血管生成中起著關(guān)鍵作用。EphrinB2的完全失活和EphrinB2胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的缺失都會損害小鼠的血管生成并導(dǎo)致胚胎死亡。Foo等人觀察到,EphrinB2缺乏癥小鼠在真皮組織異常血管周圍表現(xiàn)出異常纖維化,這表明EphrinB2信號可能在纖維發(fā)生中起作用。有研究發(fā)現(xiàn)EphrinB2具有保護腎損傷的有益作用。但也有研究發(fā)現(xiàn)在特發(fā)性肺纖維化患者的培養(yǎng)成纖維細胞中,EphrinB2表達增加,并且能夠在體外誘導(dǎo)人肺成纖維細胞分化為肌成纖維細胞。綜上所述,這些發(fā)現(xiàn)提示:EphrinB2可能對纖維化有組織特異性的作用。然而,EphrinB2在心肌纖維化中的作用尚不清楚。

2017年,浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院心內(nèi)科和英國倫敦國王學(xué)院BHF中心心血管科 Sheng-an Su等人在《Circulation Research》(IF= 15．862;SCI醫(yī)學(xué)1區(qū))發(fā)表了題為“EphrinB2 Regulates Cardiac Fibrosis Through Modulating the Interaction of Stat3 and TGF-β/Smad3 Signaling”的文章。

所用到的主要方法

1．臨床組織樣本檢測

2．小鼠模型:MI模型;心肌肥厚

3．超聲心動圖測量心功能指標

4．慢病毒構(gòu)造

5．質(zhì)粒構(gòu)建

6．原代細胞的提取及鑒定

7．CO-IP

8．免疫組化

9．免疫熒光染色

10．天狼星紅染色;

11．傷口愈合實驗和細增值實驗

文章主要內(nèi)容摘要

背景:無論病因如何,心臟纖維化是導(dǎo)致心力衰竭的左心室重構(gòu)的一個常見特征。EphrinB2(產(chǎn)生促紅細胞生成素的肝癌相互作用體B2)是哺乳動物體內(nèi)廣泛表達的一種關(guān)鍵的雙向信號分子,在發(fā)育和疾病進展過程中對血管生成至關(guān)重要。最近,有報道稱,EphrinB2能保護腎臟免受損傷引起的纖維化。然而,其在心肌纖維化中的作用尚待闡明。目的:探討EphrinB2在心肌纖維化中的作用及其在病理重塑過程中的作用機制。方法與結(jié)果:EphrinB2 在晚期心力衰竭患者心肌及心肌梗死和血管緊張素II灌注致心肌肥厚小鼠模型中均高表達,并伴有肌成纖維細胞活化和膠原纖維沉積。相比之下,心肌內(nèi)注射攜帶EphrinB2 shRNA的慢病毒可改善心肌梗死小鼠模型的心肌纖維化和心功能。此外,體外培養(yǎng)的心臟成纖維細胞的研究表明,EphrinB2促進心肌成纖維細胞在常氧和缺氧條件下分化為肌成纖維細胞。在機制上,EphrinB2通過激活Stat3和TGF-β/Smad3信號發(fā)揮了對心肌成纖維細胞的促纖維化作用。本文進一步確定EphrinB2調(diào)節(jié)了Stat3和Smad3之間的相互作用,并確定Smad3的MAD同源2結(jié)構(gòu)域和Stat3的螺旋結(jié)構(gòu)域及DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)了這種相互作用。結(jié)論:本研究首次揭示EphrinB2在心肌纖維化中的促纖維化作用是通過Stat3與TGF-β/Smad3信號的相互作用實現(xiàn)的,表明其可以在纖維化疾病和心力衰竭中作為一個很好的治療靶點。