前言

腫瘤免疫治療是通過人體免疫系統(tǒng)恢復(fù)或增強對腫瘤的自然防御的一種治療方法。這種治療通常針對癌細(xì)胞表面的特定生物分子,如腫瘤相關(guān)抗原(TAAs)�？鼓[瘤活性是通過將宿主免疫系統(tǒng)導(dǎo)向TAAs來實現(xiàn)的,從而建立或誘導(dǎo)針對癌細(xì)胞的適應(yīng)性免疫反應(yīng)。在過去的幾十年里,利用單克隆抗體(Mab)治療癌癥取得了巨大的成功,其中許多已經(jīng)被批準(zhǔn)用于癌癥治療或臨床試驗。

4-1BB(CD137/TNFRSF9)于1989年被鑒定為一種誘導(dǎo)基因,在抗原啟動的T細(xì)胞上表達,而在靜止的T細(xì)胞上不表達。此外,已知其在樹突狀細(xì)胞(DC)、自然殺傷細(xì)胞(NKs)、活化的CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、自然殺傷T細(xì)胞(NKT)和肥大細(xì)胞中表達,但骨髓源性抑制細(xì)胞(MDSCs)在其表面不表達該分子�？�4-1BB抗體具有激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞和增加γ干擾素(IFN-γ)生成的能力,在抗癌方面顯示出巨大的潛力。

4-1BB的分子特性

腫瘤壞死因子受體超家族(TNFRSF)是一個由29個成員組成的蛋白質(zhì)超家族,在人類免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用。這個分子家族分為兩類:死亡受體(8個成員)和激活受體。它們都含有一個細(xì)胞內(nèi)信號通路激活域和一個細(xì)胞外受體位點。這些受體位點可通過與腫瘤壞死因子超家族(TNFSF)的相應(yīng)配體結(jié)合來激活。已有研究表明,TNFSF-TNFRSF的配體受體(如CD40-CD40L、CD27-CD70或OX40-OX40L)信號通路可以調(diào)節(jié)體內(nèi)許多重要的過程,如細(xì)胞的發(fā)育和死亡,細(xì)胞因子和趨化因子的誘導(dǎo)。越來越多的證據(jù)表明,TNFRSF和TNFSF成員參與了包括癌癥在內(nèi)的多種疾病的炎癥和病理學(xué)。因此,針對TNFSF和TNFRSF配體-受體相互作用的免疫治療技術(shù)在癌癥治療中具有很高的潛力。

在免疫治療中,有效的免疫反應(yīng)需要兩種生物信號來充分激活T細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞。第一種信號即抗原特異性信號,是由淋巴細(xì)胞受體與抗原呈遞細(xì)胞(APCs)上主要組織相容性復(fù)合體(MHC)分子結(jié)合的特異性肽相互作用而產(chǎn)生的。第二種是非抗原特異性的共刺激信號。這種類型的信號是通過T細(xì)胞和APCs上表達的共刺激分子之間的相互作用提供的。4-1BB是一種共刺激分子,屬于TNFRSF。它是在80年代末進行T細(xì)胞因子篩選時,對小鼠輔助T細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞用刀豆球蛋白A刺激發(fā)現(xiàn)的。人4-1BBL于1994年首次通過直接表達克隆從活化的CD4+T淋巴細(xì)胞群中分離出來。4-1BBL主要在樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞或巨噬細(xì)胞上表達。

在小鼠中,4-1BB/4-1BBL激活導(dǎo)致TNFR因子(TRAF1和TRAF2)的募集,從而導(dǎo)致活化B細(xì)胞的NF-κB、JNK/SAPK和p38 MAPK通路的激活。這會產(chǎn)生共刺激信號來誘導(dǎo)CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞的活性,其中對CD8+T細(xì)胞的增殖更有利。通過p38 MAPK激活CD4+T淋巴細(xì)胞對于輔助性T細(xì)胞(Th)1和2的發(fā)育以及Th1效應(yīng)細(xì)胞的調(diào)節(jié)也是必不可少的。試驗證明,4-1BB的激動劑單克隆抗體可向CD8+T淋巴細(xì)胞提供長期存活信號,從而抑制活化誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡(AICD)。4-1BB/4-1BBL通路也影響免疫系統(tǒng)中的非T細(xì)胞,包括通過放大單核細(xì)胞介導(dǎo)的恒定自然殺傷T細(xì)胞(iNKT)的增殖來控制單核細(xì)胞數(shù)量。4-1BB和/或4-1BBL激動劑可刺激脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生多種炎癥細(xì)胞因子,如IL-6、TNF-α和MCP-1。B細(xì)胞上4-1BB交聯(lián)產(chǎn)生共刺激信號,激活并誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖。

4-1BB激動劑抗體在動物模型中的抗腫瘤作用

抗4-1BB激動劑單抗已被證明在幾種癌癥模型中誘導(dǎo)和提高抗癌免疫能力。這種抗體抑制腫瘤的機制是它對調(diào)節(jié)機體對癌細(xì)胞免疫反應(yīng)的關(guān)鍵免疫細(xì)胞的作用�？�4-1BB抗體刺激并激活效應(yīng)T淋巴細(xì)胞(例如,刺激CD8+ T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生INFγ)、NKT和APCs(例如巨噬細(xì)胞)選擇性地殺死癌細(xì)胞。在抗4-1BB單抗的刺激下,腫瘤抗原特異性記憶T細(xì)胞的數(shù)量和活性也增加,從而延長了對癌細(xì)胞的免疫反應(yīng)。包括4-1BB在內(nèi)的幾種TNF受體主要作為T細(xì)胞活化的共刺激因子發(fā)揮作用。此外,共刺激4-1BB可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白和細(xì)胞周期蛋白依賴激酶激活A(yù)kt促進細(xì)胞周期。然而,這種抗體對NK細(xì)胞的作用仍然存在爭議:這種抗體激活小鼠NK細(xì)胞,而對于人類NK細(xì)胞即可以激活也可以抑制,取決于條件和模型。另一方面,這種抗體抑制免疫抑制細(xì)胞的增殖和活性,如MDSCs和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。另據(jù)報道,抗4-1BB抗體可阻斷IL-9的產(chǎn)生以抑制T調(diào)節(jié)細(xì)胞。

抗4-1BB抗體對腫瘤免疫的影響是通過4-1BB受體對腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞、癌細(xì)胞和其他細(xì)胞的共刺激。因此,需要在靶細(xì)胞和宿主細(xì)胞上表達4-1BB,而對腫瘤細(xì)胞或宿主細(xì)胞(抗原特異性記憶T細(xì)胞和來自造血和非造血來源的細(xì)胞)的4-1BB基因敲除可消除該抗體的抗腫瘤作用。腫瘤相關(guān)內(nèi)皮細(xì)胞表面4-1BB的特異性存在增加了活化T細(xì)胞向惡性組織的遷移。此外,抗4-1BB單抗誘導(dǎo)的淋巴瘤排斥反應(yīng)需要穿孔素顆粒酶和FAS-L機制的細(xì)胞溶解協(xié)同作用。

激動劑抗4-1BB抗體增強抗腫瘤免疫,保護小鼠免受肝癌侵襲。這種結(jié)果是由于這種抗體對細(xì)胞毒性T細(xì)胞、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的激活作用。此外,該抗體還會限制抑制抗腫瘤免疫的細(xì)胞(如MDSC和調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞)的浸潤。在小鼠惡性黑色素瘤模型中,抗4-1BB抗體通過擴增抗原特異性記憶T淋巴細(xì)胞來防止原發(fā)性腫瘤切除后癌癥的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。在小鼠中,抗4-1BB單抗可有效預(yù)防淋巴瘤,如誘導(dǎo)腫瘤大小縮小和生存率增加,因為它增強NKs和CD8+淋巴細(xì)胞的功能,而抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。值得注意的是,這種抗體模擬的抗淋巴瘤免疫是持久的�？�4-1BB單克隆抗體的這些抗腫瘤活性也在小鼠肺癌(M109)和乳腺癌(EMT6)模型中觀察到。用抗4-1BB抗體(BMS-469492)治療可以適度地使M109腫瘤的生長減慢,但可以顯著地阻止EMT6腫瘤的發(fā)展,尤其是在聯(lián)合放療的情況下。

4-1BB激動劑抗體的單藥治療

4-1BB抗體在動物體內(nèi)預(yù)防癌癥的效果促進了臨床的開發(fā)。在一項臨床前研究中,一種與4-1BB胞外域結(jié)合的人IgG2,即PF-05082566,可以有效地防止異種移植人類癌癥模型的進展。這種抗4-1BB抗體激活NF-κB,誘導(dǎo)人和猴白細(xì)胞產(chǎn)生下游細(xì)胞因子,并促進猴CD8+T細(xì)胞增殖。抗4-1BB單抗已被考慮用于晚期癌癥患者的臨床試驗,但由于4-1BB受體上抗4-1BB抗體結(jié)合位點的物種間差異,其抗癌能力應(yīng)該是多變的。具體地說,它的結(jié)合作用僅限于富含半胱氨酸結(jié)構(gòu)域(CRD),并且在小鼠和人之間存在差異。小鼠4-1BBL主要與CRDII結(jié)合,人4-1BBL主要與CRDIII結(jié)合。簡言之,人和小鼠的4-1BB CRD有四個CRD(CRDI,II,III和IV)。CRDI和CRDIV區(qū)都只含有4種半胱氨酸,不能形成典型的CRD結(jié)構(gòu),而CRDII和CRDII都含有6種半胱氨酸,可以形成典型的CRD結(jié)構(gòu)。

目前,針對兩種抗4-1BB單克隆抗體,即urelumab(BMS-663513)和utomilumab(PF-05082566)正在進行兩項臨床試驗。它們是分別由百時美施貴寶和輝瑞公司開發(fā)。在一項臨床前研究中,Urelumab顯示了一種很有前途的癌癥治療潛力。然而,抗體的肝臟毒性在隨后不久出現(xiàn),這導(dǎo)致了2008年12月至2012年2月期間,urelumab開發(fā)計劃被擱置。這種毒性主要是由于腫瘤和基質(zhì)細(xì)胞分泌的S100A4蛋白所致。最近的研究表明,每3周每名患者注射8毫克或0．1毫克/千克的抗體是安全的。

與urelumab相比,utomilumab在27名癌癥患者隊列中沒有觀察到劑量限制性毒性(DLT)或肝酶升高。最近,utomilumab治療55例晚期癌癥患者的I期試驗結(jié)果出來了。試驗數(shù)據(jù)支持了utomilumab耐受性良好的安全性,每4周在10mg/kg的劑量水平下未觀察到DLT。除此之外,大多數(shù)患者出現(xiàn)1級或2級以下的不良事件。實體瘤患者總客觀響應(yīng)率為3．8%,最佳總有效率為24．5%,其中完全緩解1例。在臨床環(huán)境下,urelumab或utomilumab的毒性差異的機制已經(jīng)比較清楚,這可能是由于它們的激動劑活性或4-1BB結(jié)合特性的機制差異所致。utomilumab和urelumab結(jié)合受體結(jié)構(gòu)的比較表明,單抗在表位和相對取向上具有明顯不同的結(jié)合位點。utomilumab沿著4-1BB側(cè)結(jié)合,在CRD III和IV的交界處接觸。相比之下,urelumab結(jié)合在CRD I上4-1BB受體的N端。使用劑量減少的Ureumab單藥治療的臨床療效結(jié)果基本無效,并且在耐受劑量下,Urelumab的臨床活性有限。雖然有報道稱,utomilumab具有更好的安全性,但相對于urelumab,它是一種藥效較弱的4-1BB激動劑。由于其較好的安全性,與urelumab相比,utomilumab是聯(lián)合治療的首選單抗。

在血液腫瘤中,抗4-1BB抗體的單一免疫治療在某些模型中可以調(diào)節(jié)血液惡性腫瘤。在多發(fā)性骨髓瘤小鼠模型中,與對照組相比,該抗體可挽救治療組40-50%的小鼠。抗4-1BB單抗還抑制了50%實驗動物的急性髓系白血病(AML)的生長�？�4-1BB單克隆抗體的這些抗血液腫瘤的結(jié)果是由于CD8+ T細(xì)胞和IFN-γ的增加。

4-1BB抗體與其它抗體的聯(lián)合治療

在幾種癌癥模型中,抗4-1BB受體的特異性抗體與其他抗體在抑制腫瘤方面具有協(xié)同作用。在這些聯(lián)合療法中,抗體相互支持,以實現(xiàn)相對于單一治療對癌癥的更高的免疫反應(yīng)。

調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞、吲哚胺-2,3-雙加氧酶(IDO)+DCs或T細(xì)胞以及粘蛋白結(jié)構(gòu)域3(TIM-3)等調(diào)節(jié)性屏障可抑制免疫系統(tǒng)對致癌抗原的免疫反應(yīng)。這就解釋了為什么在抗4-1BB單克隆抗體試驗中,監(jiān)管屏障的缺失成為提高對癌癥的免疫反應(yīng)的目標(biāo)�？�4-1BB單抗與西妥昔單抗(Cetuximab)聯(lián)合用藥可增強西妥昔單抗的抗腫瘤作用。西妥昔單抗上調(diào)患者NK細(xì)胞4-1BB的表達,這種共刺激分子的表達誘導(dǎo)NK細(xì)胞和記憶T細(xì)胞活化。而抗4-1BB單克隆抗體則通過激活4-1BB受體來提高NK細(xì)胞脫顆粒和細(xì)胞毒性,從而增強抗癌免疫能力。S100A4是一種鈣結(jié)合蛋白,在炎癥反應(yīng)和肝臟發(fā)病機制中具有重要作用。如前所述,抗4-1BB單抗主要通過S100A4分泌引起肝毒性�？�4-1BB和抗S100A4單克隆抗體的聯(lián)合免疫治療比抗4-1BB單抗治療顯示出更強的抗腫瘤反應(yīng),并且顯著降低了小鼠模型的肝臟病理學(xué)改變。

程序性死亡受體-1(PD-1)提供抑制信號,維持T淋巴細(xì)胞對同源抗原的功能沉默;因此,其特異性抗體干擾PD1可導(dǎo)致T細(xì)胞活化,并在PD-1阻斷和抗4-1BB抗體聯(lián)合治療下增強抗腫瘤免疫能力。用抗PD1或抗4-1BB單抗單藥治療小鼠模型中超過第17天的肺癌是無效的,而這兩種抗體的組合顯示出完全的腫瘤排斥反應(yīng)。通過連續(xù)給藥抗4-1BB和抗PD1單抗而不是單用治療小鼠B細(xì)胞淋巴瘤,獲得了更高的療效增強,協(xié)同治療依賴于Fc受體。單抗抗腫瘤活性的主要機制是Abs依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)。ADCC使攜帶Fc受體(CD16)的NK細(xì)胞與抗體靶向的腫瘤細(xì)胞結(jié)合并促進腫瘤細(xì)胞溶解。在B16黑色素瘤荷瘤小鼠中也觀察到了同樣的觀察結(jié)果,抗4-1BB/抗PD-1組合比抗4-1BB、-PD1、-CTLA-4或-CD4的單抗治療更有效地減少癌癥的發(fā)生。

在臨床前試驗中,抗4-1BB單克隆抗體與抗PD1、-CTLA-4或-CD4抗體的聯(lián)合免疫療法對某些癌癥藥物產(chǎn)生了積極效果,但對其他一些癌癥卻沒有效果,例如在B細(xì)胞淋巴瘤小鼠模型中聯(lián)合抗4-1BB和抗PD1抗體。特異性抗體阻斷PD1蛋白支持抗4-1BB單抗治療小鼠卵巢癌和肺癌�？�4-1BB和抗PD1單抗的混合療法通過誘導(dǎo)CD8+淋巴細(xì)胞的系統(tǒng)反應(yīng)和免疫記憶來提高荷瘤小鼠的存活率。抗4-1BB和抗CD40抗體的聯(lián)合治療可導(dǎo)致結(jié)腸癌和淋巴瘤荷瘤小鼠的腫瘤消退和生存期延長,但這種聯(lián)合治療在預(yù)防多發(fā)性淋巴瘤方面的作用不大。通過特異性抗體清除CD4+ T細(xì)胞或阻斷TIM-3使抗4-1BB單抗的抗癌作用更為有利�？笴D4抗體去除調(diào)節(jié)性淋巴細(xì)胞和IDO+DC細(xì)胞,增強免疫細(xì)胞向腫瘤組織的浸潤。因此,混合注射抗CD4和抗4-1BB抗體可使荷黑色素瘤小鼠的癌癥明顯消退。此外,聯(lián)合抗TIM-3治療和4-1BB激活不僅抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和激活CD8+淋巴細(xì)胞,而且還通過促進記憶性CD4淋巴細(xì)胞和減少免疫系統(tǒng)中的MDSC,對ID8卵巢癌提供更強的免疫應(yīng)答。

通過抗體阻斷細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4(CTLA-4)和CLTA-4配體之間的相互作用可提高整體免疫反應(yīng),通過混合注射抗4-1BB和-CTLA-4抗體可以顯著緩解結(jié)腸癌和黑色素瘤。這種聯(lián)合策略通過抗原特異性增強CD8+ T細(xì)胞活性和免疫記憶來提高抗癌免疫,但是也會通過增加調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的功能而抑制自身免疫。進一步的研究表明,抗CTLA-4和抗4-1BB抗體的聯(lián)合免疫治療僅在腫瘤特異性T細(xì)胞尚未耗盡的情況下有效。

抗4-1BB單克隆抗體在癌癥治療中也顯示了三重結(jié)合聯(lián)用的益處�？�-PD1和-CTLA-4抗體對抗免疫抑制性Th2,以支持抗4-1BB單抗逆轉(zhuǎn)已建立的腫瘤,這些抗體的抗腫瘤活性通過放療增強。與抗OX40和抗PD-L1抗體聯(lián)用,抗4-1BB抗體通過增加效應(yīng)T淋巴細(xì)胞來預(yù)防小鼠肝細(xì)胞癌。在小鼠CT26腫瘤模型中,抗4-1BB單抗與特異性抗體阻斷PD-L1/B7-H1具有協(xié)同作用。這種抗體組合的抗腫瘤作用通過腫瘤微環(huán)境中的T細(xì)胞中的HIF-1α低氧反應(yīng)而增強。值得注意的是,低劑量的抗4-1BB單抗可產(chǎn)生抗腫瘤的免疫反應(yīng),而不會產(chǎn)生任何副作用(例如肝臟炎癥)。最近,抗4-1BB、-CTLA4和-OX40單克隆抗體的低劑量(各10μg)三重組合對小鼠模型中的大腸癌和B細(xì)胞淋巴瘤有效。相反,最近的研究表明,抗4-1BB與抗PD1單抗抑制Eμ-myc轉(zhuǎn)基因小鼠B細(xì)胞淋巴瘤的治療潛力降低。

在乳腺腫瘤的異種移植模型中,抗4-1BB單抗增加了曲妥珠單抗的抗癌作用。在這一組合中,曲妥珠單抗刺激NK細(xì)胞活性并增強4-1BB在這些細(xì)胞中的表達,然后抗4-1BB單抗提高了曲妥珠單抗調(diào)節(jié)的NK細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子釋放,從而殺死腫瘤細(xì)胞�？�4-1BB單抗還支持曲妥珠單抗治療小鼠乳腺癌。utomilumab聯(lián)合pembrolizumab(一種抗PD1抗體)治療23例晚期實體瘤患者的Ib期臨床試驗報告有26．1%的應(yīng)答(完全或部分應(yīng)答),沒有DLTs;在應(yīng)答患者中觀察到效應(yīng)/記憶CD8+淋巴細(xì)胞水平升高。這些發(fā)現(xiàn)提示通過抗4-1BB單抗與其他抗體的聯(lián)合治療可能讓更多的癌癥治療獲益。

4-1BB抗體與其它方法的聯(lián)合治療

抗4-1BB受體的單抗對免疫原性差的腫瘤細(xì)胞(弱腫瘤抗原)無抗癌作用,如B16-F10黑色素瘤、3-甲基膽蒽誘導(dǎo)的纖維肉瘤和TC-1肺癌。因此,將抗4-1BB抗體與其他試劑結(jié)合是必要的。

一種攜帶mIL-12(ADV/IL-12)的腺病毒已被開發(fā)并被證明支持抗4-1BB單抗對抗B16-F10腫瘤細(xì)胞引起的皮下和肺轉(zhuǎn)移性黑色素瘤。這種重組病毒誘導(dǎo)的IL-12刺激NK細(xì)胞激活免疫系統(tǒng),導(dǎo)致CD8+T淋巴細(xì)胞募集到腫瘤微環(huán)境中,而抗4-1BB的抗體則增加了這些招募的T細(xì)胞的功能。全身注射這種抗體可提高分泌IL-12的DC治療結(jié)腸癌的根除效果。IL-12還支持抗4-1BB單抗治療肝癌;ADV/IL-12和抗4-1BB特異性抗體的聯(lián)合治療通過增加NK和CD8+ T淋巴細(xì)胞的功能,有效地排斥肝內(nèi)發(fā)生的轉(zhuǎn)移性腸癌。SFV-IL-12(編碼IL-12的semliki Forest病毒)和抗4-1BB抗體的組合提供了強大的協(xié)同作用,以預(yù)防小鼠黑色素瘤和肺癌。瘤內(nèi)注射這種產(chǎn)生IF-12的病毒可誘導(dǎo)腫瘤區(qū)浸潤的CD8+ T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生高水平的4-1BB,這為單抗的抗癌活性提供了更多的選擇性靶點。

4-1BB抗體增強了粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)分泌細(xì)胞的活性以治療癌癥,GM-CSF分泌細(xì)胞療法和抗4-1BB單抗的聯(lián)合治療通過維持腫瘤浸潤性CD8+ T淋巴細(xì)胞的活化,使已建立的B16黑色素瘤得到顯著消除,以及腫瘤微環(huán)境中記憶淋巴細(xì)胞的擴張。注射抗4-1BB單抗修復(fù)了5-氟尿嘧啶(5-FU)抑制腎癌的局限性�？�4-1BB單抗和5-FU聯(lián)合治療可通過增加效應(yīng)淋巴細(xì)胞的浸潤有效阻斷70%以上的荷瘤小鼠。

將抗4-1BB單抗與腫瘤裂解物刺激樹突狀細(xì)胞(TP-DC)疫苗聯(lián)合治療小鼠已建立的肺癌和皮下癌模型也獲得了相同的結(jié)果。TP-DC疫苗可上調(diào)疫苗啟動淋巴結(jié)(VPLN)內(nèi)NK細(xì)胞上4-1BB的表達,抗4-1BB單克隆抗體可刺激VPLN和脾臟中1型T效應(yīng)細(xì)胞的抗癌活性,這一點在這些部位表現(xiàn)為高水平的干擾素γ�？�4-1BB單抗抗腫瘤免疫的疫苗治療應(yīng)用的另一個例子是溶瘤痘苗病毒(Vvdd)的工程株:該抗體與Vvdd的合作成功地抑制了已建立的皮下腫瘤,而Vvdd或抗4-1BB抗體單獨治療對這些腫瘤模型僅有輕微影響。注射表達抗HVEM單鏈抗體的癌癥疫苗(α-HVEM單鏈抗體疫苗)可通過CD8+T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的發(fā)育和活性來激活預(yù)防小鼠模型中的肥大細(xì)胞瘤和淋巴瘤的免疫反應(yīng)。注射抗4-1BB抗體可顯著提高α-HVEM單鏈抗體疫苗的抗腫瘤活性。

抗4-1BB抗體的抗血液學(xué)腫瘤作用可通過其他療法增強。這種抗體與α-半乳糖基神經(jīng)酰胺的腫瘤細(xì)胞疫苗接種相結(jié)合,使小鼠急性髓系白血病(ALM)模型的保護率比單獨抗4-1BB治療提高100%。當(dāng)抗4-1BB抗體與靶向NKT細(xì)胞的疫苗一起注射時,也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果,這種結(jié)合在B細(xì)胞淋巴瘤小鼠模型中的長期存活率為50-70%�？�4-1BB抗體的兩項臨床試驗,utomilumab和urelumab,在與其他免疫療法聯(lián)合治療淋巴瘤患者時,都顯示了富有前景的結(jié)果。

有證據(jù)表明,在某些組合中,天然免疫也參與抗4-1BB抗體的抗癌作用,特別是在治療血液腫瘤方面。已經(jīng)證明,這種抗體對癌細(xì)胞的作用是依賴于NK細(xì)胞的,特別是通過增殖和IFN-γ的分泌,以及這些固有淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。

4-1BB靶向藥物的開發(fā)

BMS的4-1BB抗體藥物 Urelumab(BMS-663513)是第一個進入臨床試驗的靶向4-1BB治療藥物,其是一種IgG4 單克隆抗體。Urelumab最初的臨床結(jié)果發(fā)表于2008年,有著令人鼓舞的療效。但Phase1和Phase2階段的數(shù)據(jù)顯示出肝臟毒性,并且似乎與藥物靶標(biāo)和劑量有關(guān),因此臨床開發(fā)受到了阻礙。Urelumab于2012年重新進入臨床試驗,目前正在進行研究Urelumab聯(lián)合其他藥物共同治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、胰腺癌等實體瘤的潛力。

Utomilumab(PF-05082566)是輝瑞開發(fā)的4-1BB人源化IgG2單克隆抗體,相對于Urelumab,其具有更高的安全性,目前也正在進行多項臨床試驗中。除了以上兩個,還有一些公司布局該領(lǐng)域,包括雙特異性抗體,比如BioNTech,Aptevo等。2019年6月,BioNTech宣布已開始使用DuoBody-PD-L1x4-1BB進行首次人體I/IIa期研究,DuoBody-PD-L1x4-1BB是與Genmab A/S聯(lián)合開發(fā)的雙特異性抗體,正在轉(zhuǎn)移性或不可切除的惡性實體瘤患者進行臨床試驗。Aptevo正在開發(fā)靶向4-1BB和5T4的雙特異性抗體候選產(chǎn)品ALG．APV-527。

觀之國內(nèi),也有部分4-1BB抗體領(lǐng)先企業(yè),并且關(guān)于4-1BB藥物的研究也越來越多。2018年,天演藥業(yè)的針對4-1BB靶點的激動型全人源單克隆抗體 ADG106已在中美同時獲得臨床試驗批件,開展 I 期臨床。2019年10月23日,無錫智康弘義申報臨床的4-1BB抗體WBP3425獲得NMPA受理,成為國內(nèi)第二家申報該靶點抗體的公司。2020年4月16日,上海懷越生物4-1BB抗體藥物PE0116的臨床試驗申請獲得NMPA受理。2020年8月12日,禮進生物的4-1BB抗體LVGN6051獲得NMPA受理。2020年9月25日,華海藥業(yè)的在研4-1BB抗體HOT-1030獲批臨床,用于治療晚期惡性實體瘤。

另外,國內(nèi)也有部分公司在布局PD-L1/4-1BB雙抗,如科望生物從Inhibrx公司引進的ES101、基石藥業(yè)從瑞士公司Numab引進的ND021、以及洛啟生物的納米雙抗。2019年,科望生物的雙特異性抗體 ES101 獲得中國和美國藥監(jiān)部門的臨床試驗許可,將在中美同時開展臨床試驗。ES101是一個全球首創(chuàng)、四價雙特異性抗體,它同時靶向PD-L1及4-1BB�；�石藥業(yè)從Numab獲得的ND021,是一種針對PD-L1、4-1BB和人血清蛋白(HSA)的單價三特異性抗體片斷分子。洛啟生物的納米雙抗靶向PD-L1和4-1BB。

此外,信達生物選擇了PD-1/4-1BB, IBI319是信達與禮來的合作項目,已與2021年1月啟動國內(nèi)1期臨床。IBI319的PD-1基于信迪利單抗,4-1BB親和力比PD-1低了2個數(shù)量級,提高了其安全性。

展望

檢查點阻斷免疫療法在多種腫瘤適應(yīng)癥的臨床應(yīng)用中也帶來了顯著的變化,是治療多種癌癥的有效方法。最著名的用于癌癥免疫治療的抗體是抗CTLA4和PD-1抗體。這些免疫療法在癌癥治療中的重要成果之一是2018年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎,該獎授予James Allison和Tasuku Honjo教授,他們是發(fā)現(xiàn)“檢查點”蛋白CTLA-4和PD-1的先驅(qū)�？�4-1BB與CTLA4或/和PD-1抗體在多種癌癥類型中的協(xié)同抗癌作用,為將抗4-1BB抗體應(yīng)用于免疫檢查點治療以提高癌癥治療水平提供了很好的方向。因此,需要進一步研究抗4-1BB抗體和其他抗腫瘤抗體或試劑的聯(lián)合作用機制。此外,我們還需要進一步研究免疫檢查點抑制劑在不同癌癥分期和不同類型腫瘤治療中的應(yīng)用變化。

參考文獻:

1．An Update on Anti-CD137 Antibodies in Immunotherapies for Cancer． Int J Mol Sci． 2019 Apr; 20(8): 1822．

2． 各公司官網(wǎng)