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前言

免疫檢查點抑制劑的出現(xiàn)在腫瘤免疫治療領域取得了巨大的成功，但大多數(shù)患者仍然未能獲得理想的臨床反應。人們提出了許多關于免疫治療抵抗的解釋，包括低抑制性受體（IR）配體表達，新表位的低免疫原性，高腫瘤負荷與炎癥反應比以及免疫排斥等。

檢查點阻斷療法的廣泛作用機制是通過IRs逆轉固有的T細胞抑制。這些藥物干擾了腫瘤微環(huán)境（TME）中CD8＋T細胞表達的IRs與相應配體的結合，從而促進了效應T細胞細胞因子的產(chǎn)生和T細胞對刺激的反應增殖。另一方面，IR阻斷對TME中免疫抑制細胞（尤其是Treg細胞）功能的細胞內(nèi)在影響值得進一步研究。盡管CTLA－4、TIGIT、和TIM標記了更多抑制性的Treg細胞，但PD1和LAG3的作用是模棱兩可的，并且可能與具體情況有關。最近的一篇論文表明，抗PD1治療可使治療中進展過度的患者體內(nèi)的PD1＋Treg細胞恢復活力。因此，對于該領域來說，檢查點阻斷如何協(xié)調(diào)促進CD8＋T細胞激活和加強Treg細胞抑制之間的平衡是至關重要的。

近年來，神經(jīng)纖毛蛋白－1（neuronilin－1，NRP1）因其強大的雙重功能：增強Treg細胞抑制和限制CD8＋T細胞的持久反應，在免疫腫瘤學領域引起了廣泛的關注。盡管最初被認為是一種Treg細胞標志物，新的研究表明NRP1不僅對TME中固有的Treg細胞穩(wěn)定性是必需的，而且它還顯著地抑制CD8＋T細胞的抗腫瘤功能。另外，它在髓系細胞亞群中也高度表達，但其在這方面的功能不太明確。已有的臨床前結果進一步證明NRP1拮抗作用與已建立的免疫療法相結合的可行性。NRP1在TME中作為一個關鍵的免疫調(diào)節(jié)劑具有誘人的開發(fā)前景。

NRP1的基礎生物學

神經(jīng)纖毛蛋白（neuronilins，NRPs）是一種單次跨膜、非酪氨酸激酶表面糖蛋白，在所有脊椎動物中都存在，在物種間高度保守。已知存在兩種同源的NRP亞型，即NRP1和NRP2，由不同的基因編碼，這兩種NRP最初被發(fā)現(xiàn)為神經(jīng)元粘附分子。后來發(fā)現(xiàn)它們與血管生物學有關，正常胚胎血管發(fā)育需要NRP1和NRP2參與小淋巴管和毛細血管的形成。過去10年的研究表明，NRP是一種多功能蛋白質，參與除神經(jīng)和血管發(fā)育以外的多種生物過程，其中NRP1起在免疫和腫瘤發(fā)生中起主要作用。

NRP1蛋白由一個長的N端胞外結構域組成，接著是一個跨膜區(qū)和一個由43－44個氨基酸組成的非常短的胞內(nèi)區(qū)。細胞外結構域由三個主要片段組成，即兩個CUB（補體C1r／C1s，Uegf，骨形態(tài)發(fā)生蛋白1）結構域（表示為a1／a2）和兩個凝血因子V／VIII結構域（表示為FV／VIII或b1／b2），然后是MAM（與meprin蛋白酶同源，A5抗原，受體酪氨酸磷酸酶μ和К）結構域（表示為“c”）。CUB結構域是連接信號素配基所必需的，而FV／VIII結構域負責血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的結合以及不同配體（如信號素和VEGF）的對接位點。已知MAM結構域介導受體的同源二聚或異源二聚。盡管最初人們認為NRP1是一個非信號受體，因為它的胞內(nèi)區(qū)很短，但后來發(fā)現(xiàn)c端保守的PDZ（PSD－95／Dlg／ZO－1同源性）結構域結合基序（SEA）與GAIP相互作用蛋白c－末端／synectin結合，后者介導細胞內(nèi)信號傳遞和受體內(nèi)化。

NRP1能夠與廣泛的配體結合，解釋了其多樣的生物學功能。NRP1首先被確定為分泌的III類信號素的共同受體，如信號素3A（Sema3A），后來發(fā)現(xiàn)NRP1與多種生長因子結合，最顯著的是VEGF1，以及其他包括轉化生長因子β、血小板衍生生長因子C和D、和C－Met。有趣的是，最近的研究表明，NRP1還與細胞外microRNA／AGO2復合物結合并促進其內(nèi)部化，增加了NRP1調(diào)節(jié)細胞功能的另一種機制。

免疫系統(tǒng)中的NRP1

髓系細胞

NRP1在人類和小鼠的中樞神經(jīng)和血管系統(tǒng)中廣泛表達于多種組織和細胞中，而NRP1在免疫系統(tǒng)中的表達受到更多的限制和調(diào)節(jié)。NRP1被鑒定為人類樹突狀細胞（DC）的標志物，稱為血液DC抗原4（BDCA4，或CD304），在所有漿細胞樣DC（pDCs）中均有表達。pDCs被稱為“專業(yè)的”I型干擾素（IFN）產(chǎn)生細胞型，當用抗NRP1抗體治療時，顯示人類pDCs病毒感染時IFN－α釋放減少，提示NRP1在抗病毒免疫中具有免疫調(diào)節(jié)作用。其他表達NRP1的抗原呈遞細胞（APC）包括單核細胞和巨噬細胞，尤其是幾種組織內(nèi)的巨噬細胞，例如小膠質細胞和脂肪組織巨噬細胞（ATM）。單核細胞／巨噬細胞NRP1的表達通常被認為是促血管生成和抗炎的，因此有助于組織重塑和傷口愈合。在最近的一份報告中，發(fā)現(xiàn)NRP1＋ATM可通過維持葡萄糖動態(tài)平衡來預防肥胖和代謝綜合征。

T細胞

在適應性免疫中，NRP1被認為是小鼠胸腺源性Treg（tTreg）細胞的標記物，盡管這并不適用于人類Treg細胞。相反，NRP1在靜止的CD4＋輔助性T細胞和CD8＋T細胞上表達非常低。在抵抗實驗性自身免疫性腦炎（EAE）的小鼠模型中，NRP1在EAE耐受性CD4＋T細胞（同時在Foxp3＋和Foxp3－）中上調(diào)，并在功能上促成其抑制表型。其他報告有NRP1表達的T細胞亞群包括T濾泡輔助細胞和IL－17表達的不變自然殺傷性T細胞。最后，NRP1在人類胸腺上皮細胞（TEC）上結構性表達，在TEC與胸腺細胞接觸期間上調(diào)未成熟胸腺細胞，隨后被Sema3A阻斷以引導胸腺細胞遷移。

髓系細胞－T細胞相互作用

NRP1也由從人類外周血中分離出來的傳統(tǒng)樹突狀細胞表達，它可能通過同型相互作用介導樹突狀細胞和T細胞之間免疫突觸的形成來促進早期T細胞啟動。由于Treg細胞優(yōu)先表達NRP1，在沒有炎癥或外來抗原暴露的情況下，Treg細胞通過NRP1–NRP1相互作用使DC在免疫突觸上的作用時間更長，這是一種維持免疫耐受處于穩(wěn)態(tài)的機制。此外，在移植的情況下，細胞膜蛋白從APCs轉移到T細胞，稱為trogocytosis，通過幾種已知的NRP1配體（如Sema3A和VEGF）使CD4＋T細胞對抑制信號敏感。此外，VEGF作為一種免疫抑制細胞因子，可以以NRP1依賴的方式抑制脂多糖誘導的DC成熟。

總之，很明顯，NRP1介導重要的免疫調(diào)節(jié)功能，包括自我耐受和免疫穩(wěn)態(tài)，類似于一些已知的IRs的活性。然而，NRP1與經(jīng)典IRs的區(qū)別在于，它對多種細胞類型，特別是免疫抑制細胞產(chǎn)生這樣的影響。這些特征強調(diào)了為什么在癌癥的背景下檢查NRP1的功能可能是改進免疫治療的關鍵步驟。

NRP1在小鼠和人TME中的表達和功能

NRP1與癌癥之間已建立的聯(lián)系得到了三個關鍵的觀察結果的支持：（1）NRP1在多種人類癌癥類型的惡性細胞中高表達；（2）NRP1在TME中大量表達，包括基質細胞和免疫細胞；（3）NRP1的表達通常與不良的臨床預后相關。從腫瘤細胞的角度來看，NRP1通過多種功能支持腫瘤細胞的生長，包括細胞存活、新生血管生成和轉移。

在腫瘤－免疫界面，NRP1通過在TME的免疫室中協(xié)調(diào)多種抑制過程來促進免疫逃避。一方面，NRP1在樹突狀細胞和巨噬細胞中的生理作用，有助于這些細胞的抗炎表型，被腫瘤“劫持”以促進腫瘤血管生成和腫瘤相關免疫抑制。另一方面，NRP1直接影響適應性抗腫瘤免疫，這是通過調(diào)節(jié)腫瘤內(nèi)Treg細胞和CD8＋T細胞的細胞外和細胞內(nèi)抑制途徑來實現(xiàn)的。

Tregs細胞中的NRP1：穩(wěn)定性的守護者

NRP1在人體組織和免疫細胞亞群中的表達反映了在小鼠模型中的發(fā)現(xiàn)。最顯著的例外是Treg細胞。NRP1最初被認為是小鼠tTreg細胞的標記物，部分原因是它與Helios明顯共表達。事實上，小鼠Nrp1基因是Foxp3介導的轉錄調(diào)控的直接靶點，異位表達和染色質免疫沉淀實驗證明了這一點。隨后的研究表明，NRP1在血液或淋巴結中的人類外周Treg細胞上不表達。相反，健康的供體Treg細胞在體外激活時上調(diào)NRP1，表明免疫過程可能在體內(nèi)調(diào)節(jié)了NRP1的表達。盡管NRP1調(diào)控可能具有物種特異性的決定因素，但下面討論的結果表明其對Treg細胞表型和功能的影響仍然是保守的。

在癌癥的情況下，NRP1的Treg細胞表達通過至少兩個平行的途徑增強免疫抑制：通過充當VEGF的共受體促進Treg細胞向腫瘤募集，以及通過信號素－4A（Sema4a）維持腫瘤特異性Treg細胞的穩(wěn)定性。在Cd4CreNrp1L／L的NRP1敲除的小鼠腫瘤模型中，盡管大量Nrp1缺陷的Treg細胞在體外具有相同的抑制功能，但腫瘤內(nèi)CD8＋T細胞的比例和功能顯著增加。這導致在植入式和自發(fā)性腫瘤模型中提高了無瘤生存率并減緩腫瘤生長。由于NRP1在血管生成中起到VEGFR2共受體的作用，研究表明NRP1＋Treg細胞在體外沿著VEGF梯度遷移。此外，在野生型小鼠中，通過皮下注射Vegf–／–纖維肉瘤腫瘤，與Vegf＋的腫瘤相比，在野生型小鼠體內(nèi)腫瘤生長的減少可以重現(xiàn)。這些觀察結果強調(diào)了在腫瘤模型中，作為Treg細胞建立免疫抑制的關鍵成分，VEGF對Treg細胞的趨化反應的重要性。

此外，除了細胞遷移外，NRP1對維持腫瘤內(nèi)Treg細胞功能和表型至關重要。通過抗體阻斷或Treg細胞特異性基因缺失（通過Foxp3CreNrp1L／L）破壞NRP1通路，阻礙了腫瘤內(nèi)Treg細胞抑制功能，從而恢復了抗腫瘤免疫，而避免了自身免疫的外周脫靶效應。與Nrp1＋／＋野生型相比，Nrp1–／–腫瘤內(nèi)Treg細胞的Bcl2降低，活性caspase－3增加，表明生存路徑的失調(diào)。此外，Nrp1–／–瘤內(nèi)Treg細胞下調(diào)激活標記物（包括Helios、IL－10、ICOS、CD73）而出現(xiàn)特征性T輔助細胞系標記物（如Tbet、CXCR3、IRF－4和RORγT）。研究表明，NRP1定位于T細胞活化過程中的免疫突觸，通過磷酸酶和張力蛋白同源物（PTEN）抑制Akt（又稱蛋白激酶B或PKB）活性，從而減輕Akt介導的對Foxo1／3的拮抗作用，穩(wěn)定Treg細胞功能。后續(xù)研究表明，雖然腫瘤內(nèi)Nrp1缺陷的Treg細胞保留了Foxp3的表達，但出現(xiàn)促炎性表型和IFN－γ的增加，表明其抑制功能的喪失。有趣的是，Nrp1–／–Treg細胞產(chǎn)生IFNγ會引起鄰近Nrp1＋Treg細胞功能紊亂。在MC38腫瘤模型中，為了調(diào)節(jié)抗PD1的免疫治療，需要Treg細胞增加對IFNγ的敏感性來達到腫瘤清除的目的。事實上，攜帶缺乏IFN－γ受體的Treg細胞的小鼠對抗PD1不敏感。這些發(fā)現(xiàn)為進一步研究NRP1作為治療藥物的拮抗作用提供了重要的臨床依據(jù)。

許多研究報告了癌癥患者的NRP1＋Treg細胞增多。這種Treg細胞表型在胰腺癌和結直腸癌肝轉移的外周血中也有報道。在慢性淋巴細胞白血病中，在患者血液中觀察到B細胞和Treg細胞上NRP1升高，在沙利度胺治療后減少。還有報道稱，在宮頸癌患者的腫瘤引流淋巴結（TDLN）中，NRP1＋Treg細胞增多，尤其是腫瘤轉移的TDLN。此外，人NRP1＋Treg細胞的功能更為抑制，F(xiàn)OXP3和糖皮質激素誘導的TNFR相關蛋白（GITR）在NRP1＋Treg細胞中的表達增加。有趣的是，針對VEGF結合域的NRP1拮抗劑通過誘導NRP1蛋白內(nèi)化，使人腫瘤內(nèi)Treg細胞抑制降低約20％。最后，還有研究報告了外周血中NRP1＋Treg細胞的升高，原發(fā)性黑色素瘤和頭頸部鱗狀細胞癌患者的腫瘤中NRP1＋Treg細胞的比率與無病生存率呈負相關。這些發(fā)現(xiàn)共同支持了NRP1＋Treg細胞在癌癥中功能增強的觀點。此外，在癌癥患者外周血中觀察到NRP1＋Treg細胞的增加。這一發(fā)現(xiàn)在IRs中是唯一的，它們在血液樣本中的表達往往很低，可能表明循環(huán)Treg細胞上的NRP1表達可作為臨床結果的預處理或治療預后生物標志物。

NRP1對CD8＋T細胞的影響

與NRP1在小鼠胸腺來源的Treg細胞上的結構性表達不同，其在原始CD8＋T細胞上的表達是檢測不到的（無論是小鼠還是人類），其只在T細胞激活時才被誘導。CD8＋T細胞對NRP1的轉錄上調(diào)是在使用LCMV特異性（P14）TCR轉基因T細胞對CD8＋T細胞分化的早期分子和功能分析中首次發(fā)現(xiàn)的，其中NRP1轉錄在效應CD8＋T細胞和效應器到記憶的過渡期達到峰值。Nrp1上調(diào)與一組編碼參與T細胞遷移和粘附的蛋白質的基因相一致，如CCR5、CD44和p－選擇素糖蛋白配體1（PSGL－1）。這就提出了一個問題：NRP1是否也像在神經(jīng)元或內(nèi)皮細胞中一樣調(diào)節(jié)CD8＋T細胞的遷移。與這一發(fā)現(xiàn)相一致，研究人員還觀察到多克隆腫瘤內(nèi)效應CD8＋T細胞以及激活的腫瘤抗原特異性CD8＋T細胞上NRP1表達的上調(diào)（包括轉錄和蛋白水平）。因此，TCR參與似乎是推動NRP1在CD8＋T細胞中表達的必要條件，這是大多數(shù)已知的T細胞共受體所共有的特征。然而，盡管觀察到上調(diào)，NRP1在CD8＋T細胞早期啟動過程中的功能作用尚不清楚。

一些早期觀察表明NRP1可能是CD8＋T細胞中的一種IR樣分子。它首先在免疫抑制的腸道CD8＋T細胞亞群（Foxp3＋CD8＋Treg細胞）以及已知與CD4＋Treg細胞相關的分子（如PD1和CD103）上被高度誘導。這些CD8＋Treg細胞可能通過下調(diào)T細胞的效應器功能來維持體內(nèi)穩(wěn)態(tài)。在隨后的報告中，使用Gag特異性（TCRGag）CD8＋T細胞來了解調(diào)節(jié)CD8＋T細胞耐受性和免疫性的細胞內(nèi)在機制，經(jīng)測定，和PD1、LAG3和CTLA4一樣，NRP1優(yōu)先表達于耐受性、自反應性CD8＋T細胞上，盡管NRP1對于耐受性是不必要的。另外的證據(jù)表明NRP1可能在T細胞功能障礙中起作用，T細胞功能障礙是指由于缺乏共刺激或持續(xù)的抗原暴露而導致T細胞缺乏營養(yǎng)或衰竭。T細胞功能障礙表現(xiàn)為高IR共表達和效應標記物表達減少，研究發(fā)現(xiàn)NRP1屬于上述所有T細胞功能障礙狀態(tài)共有的174個基因的核心轉錄特征。

事實上，最近的一項報告表明，CD8＋T細胞NRP1在小鼠和人類中的表達僅限于以PD1高表達為標志的腫瘤內(nèi)CD8＋T細胞亞群，而在PD1－瘤內(nèi)CD8＋T細胞上檢測到NRP1＋T細胞最少。與NRP1－PD1－和NRP1－PD1＋對應物相比，NRP1＋PD1hi細胞表現(xiàn)出較高的經(jīng)典IRs（如LAG3、TIM3、TIGIT、2B4）以及與細胞增殖相關的標記物（如Ki67）和細胞毒性（如Granzyme B）。它們還表達較高水平的耗竭相關轉錄因子，如NFATc1、TOX、Blimp1和IRF4，但與細胞存活（Bcl2）和記憶／衰竭前體細胞（TCF1）相關的基因水平降低。這非常容易令人想起在慢性病毒感染和腫瘤模型中定義的“終末期衰竭”CD8＋T細胞。重要的是，NRP1在功能上參與了腫瘤內(nèi)CD8＋T細胞的終末衰竭，而不僅僅是這種功能障礙狀態(tài)的后果。具體而言，從B16F10腫瘤中回收的CD8＋T細胞經(jīng)中和抗NRP1抗體處理后，表達更高水平的穿孔素和顆粒酶B（介導CD8＋T細胞毒性活性的關鍵分子），并且對體外自體腫瘤細胞表現(xiàn)出更強的細胞殺傷作用。在同一研究中，體內(nèi)NRP1阻斷導致腫瘤生長減少，這與PD1阻斷進一步協(xié)同作用，盡管這種協(xié)同作用在體外沒有觀察到增強的細胞毒性活性。體內(nèi)和體外的差異可能是由于通過阻斷Sema3A–NRP1軸來增強新近激活的CD8＋T細胞的腫瘤募集。重要的是，在體內(nèi)抗NRP1方案下，除了CD8＋T細胞外，阻斷NRP1對細胞類型（如Treg細胞）也可能有貢獻。實際上，后者似乎得到了利用CD8＋T細胞特異性Nrp1缺陷小鼠株（E8ICreNrp1L／L）的研究的支持，這種小鼠的原發(fā)腫瘤生長與野生型相似。然而，在E8ICreNrp1L／L小鼠中，還觀察到在MC38結腸腺癌模型中，Nrp1基因敲除和PD1阻斷之間存在明顯的協(xié)同作用，進一步支持了Nrp1有助于缺陷的CD8＋T細胞介導的原發(fā)性腫瘤控制，盡管作用是間接的。

事實上，E8ICreNrp1L／L小鼠最顯著的表型是在術后腫瘤免疫小鼠模型中，它們對繼發(fā)性腫瘤的作用增強。這項觀察表明，NRP1在CD8＋T細胞中的主要作用可能是它有助于缺陷的CD8＋T細胞介導的抗腫瘤免疫記憶。具有臨床意義的是，這種模式類似于癌癥患者疾病復發(fā)的控制。進一步的研究顯示，Nrp1–／–腫瘤內(nèi)CD8＋T細胞更能維持類似干細胞的記憶／衰竭性T細胞祖細胞表型，而不是最終衰竭T細胞表型的不可逆分化。因此，這些Nrp1–／–記憶前體形成了一個更大的腫瘤特異性記憶CD8＋T細胞池，這種情況在通過基因缺陷或抗體在阻斷任何其他IRs時都沒有報道。

與效應CD8＋T細胞相比，NRP1在記憶性CD8＋T細胞上的表達在不同的研究中有很大差異。在急性病毒感染期間，與效應T細胞相比，長效記憶細胞的Nrp1基因轉錄下調(diào)（盡管比原始細胞高）。這種Nrp1表達下調(diào)在腫瘤特異性記憶CD8＋T細胞上更為顯著，其中Nrp1轉錄在初始細胞中降低到基線水平。與這些觀察結果相反，一份報告將NRP1描述為在非炎癥條件下通過肝竇內(nèi)皮細胞交叉呈遞抗原產(chǎn)生的肝啟動記憶CD8＋T細胞的表面標記物，然而，對于這些記憶性CD8＋T細胞來說，這在功能上是不必要的。這些研究之間的差異可以部分地由產(chǎn)生功能性記憶的不同體內(nèi)條件（例如炎癥環(huán)境和抗原類型）來解釋。因此，NRP1在記憶CD8＋T細胞（其他IRs可能也一樣）上的表達是由記憶形成過程中的環(huán)境決定的。

綜上所述，NRP1在CD8＋T細胞中的進化生物學支持了存在獨立的IRs或免疫“檢查點”的假設，它們分別控制腫瘤內(nèi)CD8＋T細胞的效應和記憶功能。進一步的機制解釋這一假設是至關重要的，希望可以提高T細胞靶向免疫治療的持久性，包括免疫檢查點阻斷和過繼T細胞轉移。

NRP1靶向治療腫瘤：新一代的檢查點分子

NRP1的臨床研究主要集中在其作為VEGFR2的共受體對腫瘤血管生成的貢獻上，而不是通過結合信號素或其他配體的免疫調(diào)節(jié)功能。抗NRP1單克隆抗體（MNRP1685A）的初始藥代動力學研究表明，與抗VEGF－A的bevacizumab聯(lián)合使用，可有效抑制人血管內(nèi)皮生長因子途徑。然而，隨后在I期研究中進行的安全性分析顯示出高水平的不良事件，最顯著的是2級或3級蛋白尿出現(xiàn)在超過50％的受試者，最終終止了對這種藥物的治療研究。最近對抗VEGFR2藥物ramucirumab的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，對Treg細胞有顯著影響，為推測NRP1功能和表達是否對觀察結果有貢獻留下了空間。

迄今為止，只有一種抗NRP1單克隆抗體被臨床評估其對Treg細胞功能的抑制作用。ASP1488（人IgG4，Astellas Pharma Inc．）聯(lián)合Nivolumab正在進行Ib期評估（NCT03565445），用于晚期實體瘤患者。這項試驗的結果預計將在2022年得出，這將是進一步評估靶向NRP1的臨床意義和潛力的關鍵。免疫監(jiān)測Treg細胞和CD8＋T細胞的變化，即使是在病人的外周，也可以為治療反應和作用機制提供信息。

除此之外，對NRP1靶向治療的潛在結果的觀察也可以間接地從研究信號素家族（涉及其免疫調(diào)節(jié)的主要NRP1配體群）的靶向治療上獲得。為此，盡管T細胞上NRP1的主要配體Sema4A尚未在臨床上被靶向，但是針對Sema3A（已知的NRP1配體）的藥物的臨床前評估已經(jīng)取得了令人滿意的結果。Sema3A被認為是一種血管系統(tǒng)正常化因子，它與NRPs和叢蛋白相互作用。盡管多項研究表明Sema3A的功能抑制腫瘤細胞生長和遷移，但是最近一項針對膠質母細胞瘤的研究表明，在患者衍生的異種移植（PDX）模型中，Sema3A的中和作用阻礙了腫瘤的生長。這些發(fā)現(xiàn)之間的差異仍有待研究；但是，不同腫瘤類型的腫瘤血管需求和免疫浸潤的差異可能決定了Sema3A是否具有促腫瘤或抗腫瘤功能。事實上，Sema3A內(nèi)在調(diào)節(jié)T細胞激活，因此，治療性阻斷這種相互作用可能介導增強的抗腫瘤免疫。

已有的小分子或肽拮抗劑主要針對b1結構域與VEGF－A的相互作用，以減少腫瘤細胞的遷移和血管生成，而新的候選藥物似乎還可以在體外內(nèi)在地調(diào)節(jié)Treg細胞的功能，這種組合作用可能允許降低劑量來減輕潛在的副作用。盡管人類Treg細胞在腫瘤中選擇性地表達NRP1，使其成為一個有吸引力的腫瘤特異性免疫靶點，但NRP1是由造血細胞和非造血細胞亞群（包括pDCs和內(nèi)皮細胞）結構性表達的。因此，靶向NRP1的藥物在穩(wěn)態(tài)和疾病狀態(tài)下對這些細胞類型功能的影響將進一步確定其臨床適用性。

展望

越來越多的文獻表明，NRP1是癌癥免疫治療中一種獨特的免疫調(diào)節(jié)劑。在TME中，NRP1內(nèi)在地調(diào)節(jié)Treg細胞和CD8＋T細胞功能，共同阻礙抗腫瘤免疫，并與多個IRs同時表達。NRP1有利于腫瘤內(nèi)Treg細胞的功能，這主要是通過促進它們在腫瘤床上的募集和在持續(xù)的炎癥中增強其功能穩(wěn)定性。惡性腫瘤患者的NRP1＋Treg細胞豐度較高，治療干預與外周Treg細胞NRP1表達降低有關。雖然NRP1對CD8＋T細胞效應器功能影響較小，但與其他IRs相比，NRP1對記憶形成和持久反應的影響是不同的。這些新的特點可能轉化為與現(xiàn)有標準的檢查點抑制劑并不重疊的臨床療效，從而為聯(lián)合治療提供了有根據(jù)的理論依據(jù)。

隨著越來越多的對NRP1的免疫調(diào)節(jié)作用的關注，利用靶向NRP1來改善腫瘤治療的機會在增加，而關于NRP1基本生物學和轉化應用的關鍵問題仍然存在。

我們能否進一步了解NRP1在T細胞亞群（即Treg細胞、CD4＋和CD8＋T細胞）中的分子基礎，特別是在人類中？這些機制的描述對于制定特定的干預策略、促進組合免疫療法的優(yōu)化設計以及減少治療引起的免疫相關不良事件的方法至關重要。

在眾多的NRP1配體中，哪一種與腫瘤內(nèi)的Treg細胞和CD8＋T細胞最相關？這一問題的答案將有助于明確靶向相關腫瘤相關的NRP1－配體相互作用的阻斷策略，同時保留NRP1的生理功能。

NRP1靶向治療方法能否提供新的策略來提高過繼性T細胞治療的持久性，如嵌合抗原受體（CAR）T細胞治療？在這種情況下，NRP1可能是一個可行的基因靶點，以克服CD8＋T細胞功能障礙，并提高體內(nèi)反應持續(xù)時間。

NRP1拮抗劑對TME中包括APCs和間質細胞在內(nèi)的其他細胞的功能有內(nèi)在的影響嗎？如果是這樣的話，是否有增強抗腫瘤免疫的作用？

與標準的免疫檢查點治療相結合，如抗PD1／PD－L1抑制劑，是否能達到更好的臨床療效？最佳給藥方案是什么？

人外周血T細胞（Tregs或CD8＋細胞）上的NRP1能否作為診斷腫瘤的標志物？它能被用來確定免疫治療的最佳候選者或評估治療效果嗎？

參考文獻：

Neuropilin－1： a checkpoint target with unique implications for cancer immunology and immunotherapy． Trends Immunol． 2020 Jun；41（6）：493－511．