1．4  常用滅菌方式

4、液體、氣體、或水溶性物質(zhì)－－過濾除菌法

器具：細(xì)菌過濾器

用途：不耐高溫的液體、氣體、水溶性物質(zhì)的除菌。

無菌操作

無菌操作的原則

超凈臺無菌操作  

潔凈區(qū)無菌操作

普通區(qū)無菌操作

2．1 無菌操作的原則

操作前準(zhǔn)備

必須明確物品的無菌區(qū)和非無菌區(qū)；

操作人員需穿實驗服、戴口罩及洗手，并將手擦干。同時注意空氣和環(huán)境清潔。

無菌物品的管理

無菌物品必須保存在無菌包或者滅菌容器內(nèi)，不可暴露在空氣中過久。

無菌物品和非無菌物品應(yīng)分開放置。

無菌包一經(jīng)打開即不能視為絕對無菌，應(yīng)盡早使用。

凡已取出的無菌物品雖未使用，也不可再放回?zé)o菌容器內(nèi)。

操作過程

進行無菌操作時，凡未經(jīng)過消毒的手，臂均不可直接接觸無菌物品或者超過無菌區(qū)取樣。夾取無菌物品，盡可能使用無菌鑷子。

2．2 超凈臺無菌操作

超凈空氣的流速為24～30m／min，這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染，也不會妨礙酒精燈等對器械的灼燒消毒�？沙�去大于0．3μm的塵埃、真菌和細(xì)菌孢子等等。

超凈臺操作規(guī)程

使用工作臺時，應(yīng)提前30分鐘開機，處理操作區(qū)內(nèi)表面積累的微生物，開啟紫外滅菌燈；

20分鐘后關(guān)閉滅菌燈，啟動風(fēng)機；

實驗結(jié)束后，用消毒液擦拭工作臺面，關(guān)閉工作電源，重新開啟紫外燈照射15分鐘。

操作區(qū)內(nèi)不允許存放不必要的物品，保持工作區(qū)的潔凈氣流流型不受干擾；

操作區(qū)內(nèi)盡量避免作用明顯擾亂氣流流型的動作；

操作區(qū)的使用溫度不可以超過60℃。

2．2 超凈臺無菌操作

2．2 超凈臺無菌操作

培養(yǎng)皿操作

培養(yǎng)皿開合：單手打開和蓋上皿蓋，

包括持皿法和皿加法兩種。

此操作用于制作培養(yǎng)基平板、接種等。

2．2 超凈臺無菌操作

培養(yǎng)皿操作

皿加法是將培養(yǎng)皿放在火焰附近 的桌面上，用左手的食指和中指夾住管塞，并打開培養(yǎng)皿，再注入 培養(yǎng)基，搖勻后制成平板。

2．2 超凈臺無菌操作

接種環(huán)操作

灼燒接種環(huán)

先斜放外焰灼燒接種環(huán)，然后垂直放置后繼續(xù)灼燒，再斜燒金屬桿。

2．2 超凈臺無菌操作

接種環(huán)操作

2．2 超凈臺無菌操作

涂布棒操作

灼燒滅菌可以沾酒精然后灼燒，灼燒范圍要包括其桿部。涂布將藻液滴在培養(yǎng)基表面中央。右手拿涂布棒將藻液沿一條直線來回推動，然后沿一垂直線來回推動，平板邊緣處可改變方向再涂幾次。

2．2 超凈臺無菌操作

接試管操作

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

潔凈區(qū)主要污染來源

工作人員：約占50～80％或更高

生產(chǎn)設(shè)施及物料：約占15 ～30％

環(huán)境設(shè)施：約占5％ ～20 ％

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

主要污染源

人是最大的污染源

人體、內(nèi)衣、工服外飾、衛(wèi)生、習(xí)慣和行為均會產(chǎn)生大污染；

其中皮膚、頭發(fā)、口、鼻（眼等）、工服工鞋和化妝品等均是主要污染源；

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

人員污染源主要包括以下兩個方面：

自身產(chǎn)生：自身產(chǎn)生指的是頭發(fā)、皮膚等脫落物、體表與呼吸道的排出物。

攜帶：攜帶指任何可能附著在人體、衣服上的各種塵埃粒子和微生物。

污染的形式：塵埃粒子、微生物

污染的載體：空氣、液體、表面

研究資料介紹：

咳嗽1次：散發(fā)約70萬個塵粒

噴嚏1次：散發(fā)約140萬個塵粒

交談1分鐘：1．5 萬～2．0 萬塵粒

頭及皮膚上有幾萬個到幾百萬個微生物

指夾污垢中有幾千萬個到幾十億個微生物

每只手可攜帶40萬個細(xì)菌；剛洗過的手，每平方厘米也可檢驗出3200個細(xì)菌

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

操作人員的污染有多大？

打噴嚏（左）培養(yǎng)頭發(fā)（右）

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

操作人員的污染有多大？

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

為盡量減少進入潔凈區(qū)的人數(shù)和次數(shù)。

進入潔凈區(qū)的人員應(yīng)保持最少人數(shù)。檢查和控制應(yīng)盡可能在潔凈區(qū)外面進行，生產(chǎn)無關(guān)人員盡量不進入潔凈區(qū)。

人員在進入無菌區(qū)前應(yīng)用無菌消毒劑（如75％酒精）消毒雙手，待消毒揮發(fā)干后方可進入無菌區(qū)域。

僅用無菌工具接觸無菌物料。

在處理已滅菌物料時，始終須使用無菌器具，在每次使用期間，無菌工具應(yīng)保存在A級環(huán)境（無菌袋、平皿桶、超凈臺等）中，保存方式應(yīng)能避免污染。在操作全過程中，應(yīng)在必要時更換器具。

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

快速移動會在關(guān)鍵區(qū)域產(chǎn)生紊流。它們破壞潔凈區(qū)單超越潔凈區(qū)設(shè)計及浙制參數(shù)的不良狀況。緩慢和小心移動是潔凈區(qū)內(nèi)始終遵循的基本原作應(yīng)盡緩，盡下蹲動作，更不應(yīng)躺在地面或坐在地面上。如果維修不可避免這些動作時，維修后應(yīng)立即更換衣服，并避免交叉污染。

進去結(jié)凈區(qū)后應(yīng)定期檢查著裝，尤其在進行動作幅度較大的操作之后應(yīng)確認(rèn)頭套腳套是否穿戴緊密。

為保持無菌物料附近的無菌狀態(tài)，應(yīng)在適當(dāng)?shù)膫?cè)面進行操作，在垂直單向流條件不得在產(chǎn)品上游方向進行無菌操作

2．3 潔凈區(qū)無菌操作

不在潔凈室內(nèi)作非有關(guān)事項或不正確的行為。

不在潔凈室使用錯誤的擦布或清潔物料。

不得摘下口罩和包飾（交談或呼吸）。

進入潔凈區(qū)需隨手關(guān)門，不得同時開啟兩扇或多扇門，以保持室內(nèi)壓差。

潔凈區(qū)內(nèi)開關(guān)門速度不宜過快。

傳遞窗門不得同時打開兩邊。

在潔凈區(qū)的任何時候，雙手都不應(yīng)接觸地面。如果不小心接觸了地面，那么必須立即用75％酒精進行消毒。

進入潔凈區(qū)不得用手接觸口罩、鼻子、額頭、眼睛、及祼露部位，若接觸后需及時消毒。

嚴(yán)禁面對工作區(qū)咳嗽和打噴嚏，避免不了可面對回風(fēng)口，避開工作區(qū)。

不得在回風(fēng)口處理堆存物品，阻礙換風(fēng)。

2．4 普通區(qū)無菌操作

空氣

避免在通風(fēng)口正下方或正前方操作。

可在酒精燈旁或者萬向抽氣罩下方進行操作，以讓空氣形成向上氣流。

操作過程應(yīng)迅速，動作幅度小，其他人員避免在旁邊走動，以避免產(chǎn)生氣旋。

器械

玻璃器械、氣石、氣管、槍頭、封口膜等器械耗材應(yīng)濕熱／干熱滅菌、烘干后才能使用。

油桶等不耐熱器械，應(yīng)提前紫外消殺或化學(xué)消殺才能使用。

避免未滅菌器械耗材直接接觸藻液；

環(huán)境人員

每次操作前提前用75％酒精噴灑周邊環(huán)境，噴砂操作臺，并用已滅菌抹布擦拭干凈。

操作人員需帶上口罩、一次性頭罩，用75％酒精消毒雙手才可進行操作。

操作前后均需用火焰噴槍進行瓶口消殺。

操作結(jié)束后及時清理臺面，用75％酒精擦拭消毒。

（5）藻類水處理微生物學(xué)

不同廢水成分分析

豬場廢水預(yù)處理

以廢水固碳再利用于微藻養(yǎng)殖之模組化技術(shù)開發(fā)

利用開發(fā)豬場廢水培養(yǎng)小球藻生物量和油脂的研究

建立10噸微藻循環(huán)養(yǎng)殖模組

（6）藻類開發(fā)

以微藻制備石斑魚苗餌料

以抗弧菌之微藻開發(fā)蝦飼料

另外還有以微藻生產(chǎn)1葉黃素2藻藍(lán)素3蝦紅素4多不飽和脂肪酸

現(xiàn)在商業(yè)化產(chǎn)品

（7）藻類未來拓展

創(chuàng)新畜牧處理廢水處理循環(huán)經(jīng)濟模式

畜牧廢水處理及藻類蝦紅素生產(chǎn)循環(huán)經(jīng)濟模式

藻類培養(yǎng)的基礎(chǔ)科學(xué)技術(shù)。為學(xué)生提供了在藻類養(yǎng)殖行業(yè)工作或創(chuàng)建自己的藻類養(yǎng)殖企業(yè)所需的技能。學(xué)生將學(xué)習(xí)成功培養(yǎng)各種受控環(huán)境要求的藻類。所獲得的知識將使學(xué)生為從事溫室／農(nóng)業(yè)工人、工廠技術(shù)員、工廠經(jīng)理、實驗室技術(shù)員、銷售經(jīng)理、公共關(guān)系和外聯(lián)、過程協(xié)調(diào)員、推廣服務(wù)和／或企業(yè)所有者／經(jīng)理等工作做好準(zhǔn)備。

學(xué)習(xí)成果總結(jié)

完成本課程后，學(xué)習(xí)者將能夠：

創(chuàng)造和維護一個安全的工作環(huán)境

設(shè)計、安裝、維護和操作可持續(xù)藻類養(yǎng)殖系統(tǒng)

找出浪費的做法并推薦可持續(xù)的替代方案

測量和描述能源及其與可持續(xù)系統(tǒng)的關(guān)系

闡明創(chuàng)業(yè)精神和創(chuàng)建可持續(xù)小企業(yè)的原則

課程概括：

（1）藻類簡介

（2）藻類培養(yǎng)和繁殖

（3）藻類光生物反應(yīng)器設(shè)計

（4）藻類衛(wèi)生與安全

（5）藻類水處理微生物學(xué)

（6）藻類開發(fā)

（7）藻類未來拓展

（8）藻種富集培養(yǎng)、藻種提純、藻種保存方法介紹

可持續(xù)農(nóng)業(yè)實踐影響生態(tài)健康

學(xué)習(xí)受控環(huán)境農(nóng)業(yè)了解如何幫助振興農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和支持當(dāng)?shù)氐募Z食系統(tǒng)。具體來說，你將學(xué)習(xí)溫室操作和管理技術(shù)；水產(chǎn)養(yǎng)殖和水培生產(chǎn)系統(tǒng)；和各種可持續(xù)的方法來提高所有作物的產(chǎn)量。

水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)是綜合多營養(yǎng)水產(chǎn)養(yǎng)殖（IMTA）的一個方面，它將水培科學(xué)（在沒有土壤的水中生長植物）與水產(chǎn)養(yǎng)殖科學(xué)（養(yǎng)魚）結(jié)合在一起。

魚廢料產(chǎn)生大量氮，通常被水產(chǎn)養(yǎng)殖場浪費掉。在這種循環(huán)系統(tǒng)中，這些廢物與精選的幾種礦物質(zhì)補充劑（如螯合鐵）結(jié)合在一起，為多種作物的超常生長提供生物有機肥燃料。雖然營養(yǎng)作物，如草本植物、萵苣、卷心菜和羽衣甘藍(lán)，生長最快，但它同樣也是生長結(jié)果／開花作物的高效方法，如西紅柿、辣椒、茄子、甜瓜和觀賞花。

光生物反應(yīng)器

封閉的生物反應(yīng)器最初的成本是開放池的10倍，但封閉的生物反應(yīng)器系統(tǒng)的單位面積產(chǎn)量是傳統(tǒng)的方法5至10倍。它們通過最大限度地吸收來達到營養(yǎng)和能量在一個最小的水量控制下條件的目的。藻類生長在管道中，水是連續(xù)泵送循環(huán)的。這種混合是必要的，以防止藻類細(xì)胞的沉降和支持二氧化碳和O2氧氣的均勻分布。所有增長結(jié)構(gòu)的設(shè)計目標(biāo)是最大限度地提高表面體積比，并在最佳光強下提供光飽和。

圖1：藻類養(yǎng)殖方法

家庭藻類光生物反應(yīng)器－改善你的空氣和生活方式！

這種簡單的藻類光生物反應(yīng)器每年可以從大氣中清除高達24磅的co2同時給你的家充氧，改善空氣質(zhì)量。此外，該設(shè)備可用于生長和收獲螺旋藻（藍(lán)綠藻），一種基于藻類的超級食品�？梢杂卸喾N藻的顏色來適應(yīng)任何空間。

光生物反應(yīng)器的工作原理是通過一個小型氣泵讓空氣通過水，這個氣泵將插入墻上的插座。藻類然后消耗二氧化碳，光合作用，產(chǎn)生氧氣。藻類品種可以在本公眾平臺上購買。

藻類產(chǎn)品機會亮點

藻類產(chǎn)品是可再生和可持續(xù)的。藻類種類繁多，給各個行業(yè)帶來商機。從微藻和巨藻中可以衍生出各種各樣的產(chǎn)品——從食品和營養(yǎng)食品到特殊化學(xué)品。

營養(yǎng)制品／食品：藻類是許多營養(yǎng)制品的原料，健康意識的提高也導(dǎo)致營養(yǎng)制品部門對藻類產(chǎn)品的需求增加。

制藥：使用藻類，特別是藍(lán)細(xì)菌（藍(lán)綠藻）作為抗生素和藥理活性化合物越來越受到關(guān)注。有一系列可以從藻類中提取的藥物產(chǎn)品，如治療產(chǎn)品、藥物、抗菌劑等。

生物塑料：隨著對塑料使用的日益關(guān)注，對塑料的可持續(xù)替代品的需求也越來越大。一般的生物聚合物，特別是生物塑料，提供了這樣一種可持續(xù)的選擇。目前，生物塑料由第一代和第二代原料制成。然而，公司正在尋找更可持續(xù)的替代品，如藻類，這在未來的生物塑料制造中有很大的潛力。機遇存在于各種工業(yè)領(lǐng)域，包括包裝、水、飲料、絕緣材料、特種材料等。

動物飼料：微藻富含蛋白質(zhì)，許多菌株具有理想的氨基酸特征。許多動物和魚類飼料公司現(xiàn)在開始探索藻類作為蛋白質(zhì)來源。藻類應(yīng)用增長最快的領(lǐng)域之一是水產(chǎn)養(yǎng)殖。

由于對這類產(chǎn)品的需求很大，而且還在增長，并且有著全球范圍的需求，許多企業(yè)家熱衷于涉足藻類產(chǎn)品業(yè)務(wù)。

誰將受益于藻類為基礎(chǔ)的商業(yè)機會？

熱衷于了解藻類帶來的各種商機的公司和企業(yè)，尤其是那些熱衷于以下一個或多個細(xì)分市場的公司和企業(yè)：

食品和營養(yǎng)制品

人類食物和食物補充劑

動物和魚類飼料–蝦飼料、貝類飼料、海／淡魚幼體養(yǎng)殖

生物聚合物和生物塑料

藥品

環(huán)保油漆、染料和著色劑

環(huán)保潤滑劑

環(huán)�；瘖y品

環(huán)保農(nóng)用化學(xué)品

請

請擁抱我

許來日方長

那年的畢業(yè)晚會燈光絢爛，我們仿佛看不見彼此哀傷的容顏。說好了以后要常相見，卻不料從此再未起見。