前言

自從2011年免疫檢查點(diǎn)抑制劑(ICI)ipilimumab 獲得批準(zhǔn)以來(lái),腫瘤免疫治療已經(jīng)成為癌癥治療中的一個(gè)游戲規(guī)則改變者。臨床的實(shí)踐表明抗腫瘤T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫可以改善癌癥患者的預(yù)后。然而,腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)激活多種免疫抑制機(jī)制來(lái)逃避免疫攻擊,因此免疫檢查點(diǎn)抑制劑能夠獲益的人群依然有限。

其中腫瘤產(chǎn)生的半乳糖凝集素Galectin-1、-3、-7、-8和-9是腫瘤逃避免疫控制的主要分子機(jī)制之一。這些半乳糖凝集素對(duì)建立抗腫瘤免疫反應(yīng)的不同步驟產(chǎn)生影響。半乳糖凝集素參與調(diào)節(jié)不同的細(xì)胞過(guò)程,包括細(xì)胞分化、細(xì)胞粘附和遷移、基因轉(zhuǎn)錄和RNA剪接、細(xì)胞周期與凋亡。

半乳糖凝集素在控制腫瘤微環(huán)境特性方面發(fā)揮著重要作用。腫瘤相關(guān)的缺氧和炎癥導(dǎo)致半乳糖凝集素表達(dá)失調(diào),因此,在癌癥患者的血清中檢測(cè)到這些半乳糖凝集素水平升高,并且它們?cè)谀[瘤微環(huán)境中的表達(dá)通常預(yù)示著患者的臨床預(yù)后較差。因此,我們有必要對(duì)腫瘤源性半乳糖凝集素影響抗腫瘤T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生和功能的機(jī)制進(jìn)行了深入的研究,這些知識(shí)可以幫助我們?cè)O(shè)計(jì)更有效的免疫療法來(lái)治療人類癌癥。

Galectin對(duì)胸腺T細(xì)胞的作用

生理學(xué)上,在胸腺上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞中檢測(cè)到半乳糖凝集素-1。從功能角度來(lái)看,Galectin-1誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞凋亡。高度增殖的未成熟CD4+CD8+雙陽(yáng)性胸腺細(xì)胞是Galectin-1誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的主要靶點(diǎn)。

Galectin-3在髓質(zhì)的上皮細(xì)胞和吞噬細(xì)胞中檢測(cè)到,此外,在胸腺的皮質(zhì)區(qū)域也可以少量檢測(cè)到。需要注意的是,Galectin-3對(duì)細(xì)胞具有相反的作用,這取決于其細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)的定位。與Galectin-1類似,細(xì)胞外Galectin-3誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞凋亡。然而,半乳糖凝集素-3優(yōu)先針對(duì)不同的細(xì)胞亞群(CD4-CD8-雙陰性胸腺細(xì)胞)。此外,細(xì)胞外galectin-3的促凋亡作用與細(xì)胞內(nèi)galectin-3的抗凋亡功能相反。細(xì)胞內(nèi)Galectin-3阻斷Galectin-1介導(dǎo)的凋亡,這意味著兩個(gè)半乳糖凝集素成員在胸腺細(xì)胞凋亡的控制中密切相關(guān)。

Galectin-9在整個(gè)胸腺的上皮細(xì)胞中檢測(cè)到,但與胸腺的皮質(zhì)區(qū)域相比,它在髓質(zhì)中更為豐富。同樣,與其他半乳糖凝集素相比,Galectin-9有其特殊性。Galectin-9誘導(dǎo)所有胸腺亞群的細(xì)胞死亡,由Galectin-9誘導(dǎo)的胸腺細(xì)胞凋亡涉及不同于Galectin-1和-3使用的受體。雖然目前相關(guān)受體尚不清楚,但CD44可能是一個(gè)潛在的候選受體。

Galectin-8也存在于胸腺中,但與Galectin-1、-3和-9相比,它在胸腺上皮細(xì)胞中未檢測(cè)到。這種半乳糖凝集素通過(guò)一種機(jī)制誘導(dǎo)CD4+CD8+雙陽(yáng)性胸腺細(xì)胞凋亡,該機(jī)制至少部分涉及半胱天冬酶介導(dǎo)途徑的激活。

總之,已有的研究表明半乳糖凝集素在生理?xiàng)l件下時(shí)作為胸腺細(xì)胞的促凋亡因子。而在腫瘤發(fā)生后,腫瘤大量產(chǎn)生的半乳糖凝集素可能改變從胸腺輸出到外周的T淋巴細(xì)胞的種類。

Galectin在腫瘤引流淋巴結(jié)中的作用

淋巴細(xì)胞活化的第一階段發(fā)生在引流淋巴結(jié),在那里進(jìn)行特定的克隆擴(kuò)增過(guò)程。腫瘤源性半乳糖凝集素可作為可溶性蛋白質(zhì)通過(guò)血液和淋巴管到達(dá)該位置,一旦進(jìn)入淋巴結(jié),半乳糖凝集素就會(huì)影響早期淋巴細(xì)胞活化過(guò)程。

Galectin-1在幼稚淋巴細(xì)胞向淋巴結(jié)歸巢的過(guò)程中起著主要的調(diào)節(jié)作用。因此,腫瘤源性Galectin-1可減少幼稚T細(xì)胞流入引流淋巴結(jié),從而減少T細(xì)胞活化和克隆擴(kuò)張。此外,全基因組功能分析表明,Galectin-1是淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞功能的主要調(diào)節(jié)因子之一。Galectin-1對(duì)腫瘤源性抗原和抗原呈遞細(xì)胞如何通過(guò)淋巴管到達(dá)引流淋巴結(jié)具有重要影響,Galectin-1抑制免疫原性樹突狀細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì)和穿過(guò)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移。

Galectin-3對(duì)引流淋巴結(jié)中發(fā)生的抗腫瘤淋巴細(xì)胞活化有顯著影響。最近的研究表明腫瘤Galectin-3是一個(gè)有效的抑制性檢查點(diǎn),可抑制前列腺癌微環(huán)境中的淋巴細(xì)胞增殖。此外,當(dāng)樹突狀細(xì)胞疫苗用于前列腺癌時(shí),galectin-3下調(diào)是淋巴細(xì)胞最佳激活的先決條件。

galectin -3調(diào)節(jié)T細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞之間的相互作用。首先,galectin -3缺陷的未成熟樹突狀細(xì)胞具有缺陷的運(yùn)動(dòng)特性。因此,通過(guò)控制樹突狀細(xì)胞從外周組織(包括腫瘤)向引流淋巴結(jié)的遷移,galectin -3在誘導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)中具有直接作用。此外,這種特殊的半乳糖凝集素也有助于樹突狀細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài),因?yàn)橛^察到galectin -3缺陷小鼠的漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞數(shù)量增加。有趣的是,漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞在激活抗腫瘤CD8+T淋巴細(xì)胞方面優(yōu)于傳統(tǒng)細(xì)胞。

galectin-3對(duì)T淋巴細(xì)胞也有直接作用。galectin-3調(diào)節(jié)免疫突觸的形成,限制TCR運(yùn)動(dòng),增強(qiáng)TCR下調(diào),抑制早期TCR信號(hào)通路,并控制細(xì)胞因子的產(chǎn)生。

目前,很少有研究評(píng)估galectin-8在抗腫瘤免疫激活過(guò)程中的作用。已有的研究顯示,galectin-8促進(jìn)了樹突狀細(xì)胞從抗原結(jié)合、內(nèi)化、加工到成熟的所有抗原提呈步驟。此外,重組galectin-8通過(guò)激活TGF-β和持續(xù)的IL-2受體信號(hào)傳導(dǎo)增加CTLA-4+IL-10+CD103+Tregs的分化。腫瘤可以利用這種策略阻斷引流淋巴結(jié)的免疫功能。總之,關(guān)于galectin-8在癌癥淋巴結(jié)中的生物學(xué)功能知之甚少。

多項(xiàng)研究表明,galectin-9在免疫調(diào)節(jié)中具有明顯的截然相反的作用。在激活抗腫瘤特異性反應(yīng)期間,外源性galectin-9調(diào)節(jié)抗原呈遞,促進(jìn)漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞的分化,樹突狀細(xì)胞成熟和Th1極化微環(huán)境。此外,galectin-9在T細(xì)胞激活時(shí)被招募到免疫突觸,促進(jìn)近端TCR信號(hào)。這些結(jié)果表明galectin-9對(duì)T細(xì)胞的激活和擴(kuò)張具有積極的調(diào)節(jié)作用。

另一方面,Galectin-9促進(jìn)免疫調(diào)節(jié),可增強(qiáng)iTreg的擴(kuò)增和抑制表型。此外,galectin-9還通過(guò)與Tim-3受體的相互作用促進(jìn)CD11b+Ly-6G+髓系抑制細(xì)胞的功能。

Galectin在腫瘤中的作用

對(duì)于galectin-1,實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明,來(lái)自腫瘤的galectin-1在促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中起著重要作用。這種機(jī)制仍有待探究,然而,不可否認(rèn)的是,galectin-1的促腫瘤作用需要免疫系統(tǒng)的積極參與。事實(shí)上,在免疫缺陷小鼠中,表達(dá)或不表達(dá)半乳糖凝集素-1的腫瘤生長(zhǎng)差別不明顯,這清楚地表明免疫系統(tǒng)是腫瘤galectin -1的主要靶點(diǎn)。此外,CD4和CD8+T淋巴細(xì)胞可能參與了galectin-1的作用。

腫瘤galectin-3是腫瘤部位淋巴細(xì)胞效應(yīng)器特性的另一種有效調(diào)節(jié)因子。首先,T細(xì)胞向腫瘤募集需要IFN-γ誘導(dǎo)的趨化因子CXCL9/10梯度。已經(jīng)證明,腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)中的galecti-3可阻止產(chǎn)生趨化因子梯度。

除了調(diào)節(jié)T細(xì)胞遷移,galectin-3還控制效應(yīng)器功能。galectin-3通過(guò)下調(diào)TCR降低淋巴細(xì)胞效應(yīng)器功能,從而將T浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)轉(zhuǎn)化為功能失調(diào)細(xì)胞。在腫瘤微環(huán)境中結(jié)合galectin-3的CD8+TIL共同表達(dá)LAG-3和PD-1,表明LAG-3在galectin-3介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞抗腫瘤效應(yīng)器功能抑制中的核心作用。除了對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生直接作用外,galectin-3還將巨噬細(xì)胞吸引到腫瘤并促進(jìn)其M2分化�？傊�,這些研究表明galectin-3在逃避抗腫瘤效應(yīng)器功能的腫瘤中起著中心作用。

Galectin-7可以在幾種類型的腫瘤中檢測(cè)到,總的來(lái)說(shuō),腫瘤中較高的galectin-7表達(dá)是癌癥患者生存的一個(gè)負(fù)面預(yù)后因素。galectin -7可能在腫瘤微環(huán)境和免疫監(jiān)測(cè)中發(fā)揮作用。在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞中可以檢測(cè)到galectin-7,galectin-7對(duì)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的功能影響還不清楚。另一方面,重組galectin-7誘導(dǎo)人外周T細(xì)胞凋亡,除了控制活化T細(xì)胞的存活外,galectin-7還可以被腫瘤用來(lái)下調(diào)T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子�？傊�,galectin-7對(duì)免疫細(xì)胞的功能和存活起著重要的作用,應(yīng)該被視為免疫治療的靶點(diǎn)。

目前,還沒(méi)有研究評(píng)估腫瘤galectin-8對(duì)產(chǎn)生特異性和保護(hù)性免疫反應(yīng)的影響。大多數(shù)研究集中于該蛋白在腫瘤轉(zhuǎn)移和血管生成中的作用。

在一些評(píng)估實(shí)體瘤中g(shù)alectin-9表達(dá)的預(yù)后價(jià)值的研究中觀察到了相互矛盾的結(jié)果。一些研究發(fā)現(xiàn)Galectin-9是某些類型癌癥患者的積極預(yù)后生物標(biāo)志物,galectin-9表達(dá)與總生存率之間的這種正相關(guān)性可能與galectin-9抑制轉(zhuǎn)移和誘導(dǎo)凋亡,通過(guò)在引流淋巴結(jié)中誘導(dǎo)更有效的抗腫瘤免疫反應(yīng)有關(guān)。

然而,隨著腫瘤發(fā)展成為一種慢性疾病,galectin-9的表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān),并且通常與免疫逃避有關(guān)。腫瘤內(nèi)CD103+樹突狀細(xì)胞表達(dá)Tim-3,其與galectin-9的相互作用導(dǎo)致抗原呈遞細(xì)胞失活。此外,腫瘤galectin-9與巨噬細(xì)胞上的dectin-1相互作用,促進(jìn)腫瘤耐受。因此,腫瘤半乳糖凝集素-9在控制髓系細(xì)胞特性、T細(xì)胞活化以及控制抗腫瘤免疫反應(yīng)的效應(yīng)器方面起著重要作用。

Galectin在腫瘤治療中的應(yīng)用

半乳糖凝集素可以作為影響抗腫瘤免疫反應(yīng)各個(gè)階段(T細(xì)胞遷移/激活/效應(yīng)器功能)的可溶性因子發(fā)揮作用。因此,半乳糖凝集素是腫瘤免疫治療中具有吸引力的干預(yù)靶點(diǎn)。

然而,已有的實(shí)驗(yàn)和臨床證據(jù)表明,作為單一療法的半乳糖凝集素的阻斷可能不會(huì)對(duì)癌癥治療產(chǎn)生任何顯著優(yōu)勢(shì)。然而,半乳糖凝集素與患者對(duì)化療、放療、免疫治療、抗血管生成和靶向治療的敏感性或耐藥性有關(guān),通過(guò)將半乳糖凝集素的抑制作用與已有的治療策略相結(jié)合可能是實(shí)現(xiàn)有效治療的最佳途徑。

半乳糖凝集素的抑制作用結(jié)合化療會(huì)影響抗腫瘤免疫。在大腸肝轉(zhuǎn)移中,單細(xì)胞分析定義了兩個(gè)不同的腫瘤細(xì)胞亞群,它們對(duì)化療有不同的反應(yīng):干細(xì)胞樣細(xì)胞(主要利用PD-1/PD-L1通路控制免疫的腫瘤細(xì)胞)和腸細(xì)胞樣細(xì)胞(利用Tim-3/galectin-9通路逃避免疫)。使用中和性抗Tim-3或抗galectin-9抗體可改善基于紫杉醇的化療。

galectin-1抑制和化療的結(jié)合是治療某些類型癌癥的另一個(gè)有希望的策略。事實(shí)上,通過(guò)聯(lián)合抑制galectin-1和temozolomide來(lái)治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,已經(jīng)報(bào)道了協(xié)同治療效果。這種組合治療將巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)換為M1極化,減少髓系抑制細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,并增加腫瘤的CD4+和CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)。

抑制半乳糖凝集素也可能是與放療相結(jié)合的良好策略。研究表明,放療可增加腫瘤水平galectin-1的分泌。循環(huán)中高水平的galectin-1與癌癥患者的淋巴細(xì)胞減少和放射抵抗直接相關(guān)。在卵巢癌、乳腺癌和鱗狀細(xì)胞癌模型中,使用Anginex(一種33個(gè)氨基酸的galectin-1抑制肽)與次優(yōu)劑量的輻射相結(jié)合可導(dǎo)致腫瘤消退。

抑制半乳糖凝集素也可以增強(qiáng)其他免疫療法。來(lái)自頭頸部癌癥的數(shù)據(jù)表明,galectin-1抑制可增強(qiáng)抗PD-1治療,這表明galectin-1抑制劑和抗PD1/PDL1免疫檢查點(diǎn)的組合可協(xié)同癌癥治療。此外,在一些臨床前研究中,選擇性galectin-1抑制劑OTX008抑制腫瘤生長(zhǎng)。2012年,宣布了一項(xiàng)旨在評(píng)估皮下注射OTX008治療晚期實(shí)體瘤效果的I期臨床試驗(yàn)(NCT01724320)。到目前為止,尚未通報(bào)任何結(jié)果。

在肺癌中,表達(dá)Tim-3的淋巴樣細(xì)胞和表達(dá)galectin-9的單核細(xì)胞髓源性抑制細(xì)胞的積聚與抗PD1免疫治療的耐藥性呈正相關(guān)。因此,通過(guò)體外阻斷galectin-9/Tim-3途徑可以克服抗PD-1的耐藥性。這個(gè)結(jié)果支持了一項(xiàng)I/II期試驗(yàn)(NCT02608268),該試驗(yàn)正在評(píng)估抗Tim-3抗體MBG453作為單一藥物并與抗PD-1聯(lián)合應(yīng)用于晚期惡性腫瘤患者的安全性和有效性。

galectin-3是冷腫瘤的主要決定因素,抑制galectin-3可能逆轉(zhuǎn)這種耐藥性。在同基因模型中,口服galectin-3抑制劑(GB1107)可減少人和小鼠肺腺癌的生長(zhǎng)并阻斷轉(zhuǎn)移。此外,GB1107增強(qiáng)了PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑的作用,以增加細(xì)胞毒性效應(yīng)分子的產(chǎn)生。在轉(zhuǎn)移性黑色素瘤和頭頸癌中,galectin-3抑制劑(GR-MD-02)可改善抗PD-1治療。

總之,現(xiàn)有信息強(qiáng)調(diào)了半乳糖凝集素在抗PD-1治療抵抗中所起的關(guān)鍵作用,并支持半乳糖凝集素的抑制作用在與檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合的重要性。因此,一些臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中,用galectin-3抑制劑和免疫療法治療不同腫瘤類型的患者。這些臨床試驗(yàn)包括非小細(xì)胞肺癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(NCT02575404)和黑色素瘤(NCT02117362,NCT02575404)。

小結(jié)

半乳糖凝集素腫瘤免疫中發(fā)揮著重要的作用,Galectin-1、-3、-7、-8和-9是腫瘤逃避免疫控制的主要分子,靶向抑制這些半乳糖凝集素可能在聯(lián)合放療、化療、免疫治療和靶向治療方面發(fā)揮積極的抗腫瘤作用。這需要我們更準(zhǔn)確地闡明其精確的體內(nèi)作用機(jī)制,開發(fā)更有效、更具選擇性的抑制劑,并以合理的方式將這些分子與其他抗癌策略結(jié)合起來(lái)。

參考文獻(xiàn):

1．Unraveling How Tumor-Derived GalectinsContribute to Anti-Cancer Immunity Failure． Cancers (Basel)． 2021 Sep;13(18): 4529．